P(LLA-CL)电纺纤维的制备、表征及在小血管组织工程中的应用

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如何构建具有仿生天然细胞外基质(ECM)结构和功能的小口径血管组织。工程支架,一直是血管组织工程及再生医学研究的热点和难点。理想的小血管组织工程支架应有足够的机械性能和适当的降解速度,而且还应具备良好的细胞相容性、抗凝血性和促进血管细胞的生长与血管组织重构功能。静电纺丝是一种使带电荷的聚合物溶液或熔体在静电场中射流来制备聚合物超细纤维的加工方法,通过此技术可将多种天然生物材料和聚合物材料加工制备成实芯或皮芯结构的超细纤维,由静电纺超细纤维组成小口径管状支架具有极高的比表面积、高孔隙率和相互连通的三维网络状结构,相对于传统技术制备的管状支架能够更好地模拟天然血管组织骨架结构特点;在血管支架的构建中,皮芯结构超细纤维可作为利于血管组织重构药物的缓释系统,持久有效地促进血管组织的重新构建。为了得到具有良好机械性能、生物相容性、持久抗凝血性和促进血管内皮细胞生长的小口径血管组织工程支架,本研究利用同轴静电纺技术制备以肝素为芯层材料,以P(LLA-CL)(50∶50)为皮层材料的皮芯超细弹性纤维,通过滚轴纤维接收器制备以皮芯纤维为内层,纯P(LLA-CL)静电纺纤维为外层的小口径血管支架。通过SEM、TEM、力学性能测试与肝素缓释行为分析系统地阐明了P(LLA-CL)/Heparin膜状和管状支架的形态、纤维直径大小分布、管状支架的力学性能及皮芯P(LLA-CL)/Heparin超细纤维中肝素的缓释行为。通过血管移植术,在实验动物毕格犬内,设置纯P(LLA-CL)电纺纤维血管支架和实验狗自体内皮细胞内皮化P(LLA-CL)电纺纤维血管支架对照,衡量了以P(LLA-CL)/Heparin皮芯纤维为支架内层的复合小口径管状支架的生物相容性及其抗凝血、促进支架内皮化功能上的表现,通过对血管支架通畅率及支架截面HE染色分析较为系统地评价了P(LLA-CL)/Heparin在血管组织重构中的应用前景。研究最后,为构建血管支架中层精细结构以实现在结构上仿生天然血管组织骨架中层构成,利用磁场辅助静电纺技术,制备疏水性聚合材料P(LLA-CL)/Fe3O4超细定向纤维,通过SEM、TEM和纤维膜上体外猪髋动脉内皮细胞粘附与增值分析,系统地分析了纤维的取向度,Fe3O4磁性纳米粒子在纤维中分散和分布情况及其膜状支架的生物相容性。为体外构建具有一定取向的血管组织中层骨架提供前期参考研究。研究结果表明:具有肝素缓释功能的P(LLA-CL)/Heparin小口径管状支架,具有良好的力学性能,前期较高浓度的肝素缓释有效地防止了小口径血管移植取代后血栓现象的出现,在肝素缓释后期低浓度的肝素缓释有效地促进了内皮细胞的迁移与增值,提高了小口径支架的长期通畅率,对小口径血管支架的研发具有重要的参考价值。通过磁场辅助静电纺技术制备的疏水性聚合材料P(LLA-CL)/Fe3O4超细纤维沿磁场磁力线分布,取向度极佳,可通过调节磁场来调节纤维的排列取向,且生物相容性良好。
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