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表面增强拉曼(SERS)和表面等离子体共振技术(SPRi)是最近几年刚兴起的两种检测方法,干扰性小、检测速度快、灵敏性好等优点使得它们快速发展。本研究论文利用这两种新颖的检测方法结合杂交链式反应、聚合酶循环放大技术和纳米材料技术,构建了几种能有效检测离子和蛋白质的分析方法,内容如下:1、基于靶标汞离子引发的杂交链式反应和纳米生物条码的放大技术,以表面增强拉曼作为检测手段,设计了一种检测汞离子的方法。首先利用T-Hg2+-T的稳定结合作用,将靶标分子Hg2+引入,然后利用杂交链式反应为拉曼信号分子的结合提供大量位点,生物条码中纳米材料的应用保证了大量信号分子的附着,最后利用生物素-链霉亲和素的强相互作用,将信号分子引入到磁珠上,通过检测磁珠上拉曼信号分子的强度,实现对Hg2+的有效检测。此方法新颖,简单,有创新性,为检测环境中的Hg2+提供了一种新的方法。2、构建了一种将生物纳米材料与杂交链式反应相结合,利用SPR检测Hg2+的方法。利用T-Hg2+-T的特殊结构,将两条错配的DNA与Hg2+相结合,在杂交链式反应与生物纳米材料的双重放大作用下,利用纳米材料与等离子的耦合作用与增重效应,可以增强SPR的信号值,实验中的检测到的最低浓度1.0×10-10 M。此方法可以快速、有效、高选择性地检测Hg2+,为定量检测重金属离子打开了新思路。3、此方案充分利用聚合酶的放大作用与生物纳米材料的表面增强等离子效应,实现了对凝血酶的检测。利用凝血酶与适体的特异性相互作用,将定量的凝血酶转换为易于操作的DNA。发卡DNA与S1生物识别保证了实验的特异性,然后利用金胶纳米粒子和量子点的耦合效应来增强信号。DNA聚合酶可以进行一系列重复大量的聚合置换反应,因此多重放大反应的应用实现了对凝血酶的有效检测。此实验方案温和,简单,经济,将适体与凝血酶的特异性结合换成别的识别作用,就可以广泛应用于小蛋白质的检测。