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本研究利用基因重组技术构建了rhuPA_a-melittin-pPICZαC真核表达载体以及可任意替换uPA B链的rhuPA_a-X-pPICZαC真核表达载体。利用80L发酵罐，进行了rhuPA_a-melittin表达条件的优化，并建立一种适合于大规模发酵及纯化的新方法，获得高产量、高纯度、高活性的rhuPA_a-melittin。利用光镜、电镜、细胞免疫荧光、DNA电泳、流式细胞仪和酶联免疫检测仪、细胞免疫化学染色等实验方法和技术，观察rhuPA_a-melittin对人卵巢癌细胞SKOV3的细胞形态、生长曲线、细胞增殖周期、细胞基因组DNA、凋亡、凋亡相关蛋白等指标的作用情况。旨在比较全面、系统的研究rhuPA_a-melittin体外抗人卵巢癌的治疗作用并初步探讨其作用机制。本研究的创新之处在于：①首次构建了rhuPA_a-melittin-pPICZαC真核表达载体，为研究以uPA为靶点的卵巢癌靶向治疗奠定了基础；②首次在毕赤酵母中高效表达rhuPA_a-melittin；③首次建立了大规模发酵和纯化rhuPA_a-melittin的新方法；④首次应用rhuPA_a-melittin在体外研究其抗卵巢癌作用并初步探讨其作用机制。