迟缓爱德华氏菌和鳗弧菌是两种重要的鱼类致病菌,可分别引起爱德华氏菌病和弧菌病,导致世界范围内养殖鱼类的重大损失。目前,针对上述两种病原菌的感染,多种形式的疫苗已经被广泛的研究,包括灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等。其中,灭活疫苗由于安全性高、成本低廉等优势在水产养殖行业被广泛应用,然而灭活疫苗无法在鱼体内繁殖的缺陷常导致免疫原性偏低,选择有效的免疫佐剂或免疫增强剂是增加灭活疫苗免疫保护效果的重要手段。本研究首先以鳗弧菌灭活疫苗为基础进行灭活疫苗佐剂的筛选,发现鳗弧菌灭活疫苗单独免疫大菱鲆或与佐剂配合使用时均获得良好免疫保护效果,不适合灭活疫苗佐剂的筛选。而后以迟缓爱德华氏菌灭活疫苗为基础,进行迟缓爱德华氏菌灭活疫苗佐剂的筛选。研究发现,在13种不同的佐剂疫苗组中,以鞭毛蛋白FlgD为佐剂的迟缓爱德华氏菌灭活疫苗组免疫大菱鲆之后获得良好的免疫保护效果,免疫大菱鲆一个月后的相对免疫保护率达到70%。此外,免疫大菱鲆体内特异性抗体水平在免疫后第三周达到最大值,免疫反应相关因子基因,如MHC-I, IgM, IL-1β, TCR,和TNFα等的表达也在免疫大菱鲆体内显著上调,上述结果都表明以鞭毛蛋白FlgD为佐剂的迟缓爱德华氏菌灭活疫苗能够同时激活大菱鲆体内的体液免疫和细胞免疫。由此可见,鞭毛蛋白能够有效增强迟缓爱德华氏菌灭活疫苗的免疫保护效果,可以作为鱼类疫苗的潜在佐剂,用于后续疫苗产品的开发。