三产地百香果果皮中活性多酚研究

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百香果(Passiflora edulis Sims)受到越来越多消费者喜爱,在我国南方多地种植,伴随电商和运输条件的高速发展,已经成为多省脱贫致富的法宝。在果实加工过程后,鲜重占比最大的果皮,利用率不高,其中的次级代谢产物资源大部分被浪费。同时国内外对于多地种植的百香果果皮内次级代谢产物均缺乏全面深入研究,阻碍了果皮在不同领域精准化开发。本论文比较研究了百香果三大主产地-四川省凉山彝族自治区、广西壮族自治区玉林市和福建省龙岩市的果皮中活性多酚类化合物,明确其中多酚组成和含量,并测试其体外活性。主要研究内容和结果如下,采用超声辅助乙醇法提取三产地百香果果皮多酚,粗提物提取率在11.43±1.25至16.21±0.44%之间。有机溶剂石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取富集粗提物,其中正丁醇萃取物(378mg)浸膏较多。进一步活性追踪下,对正丁醇萃取物大孔树脂纯化分段,70%:6-9洗脱物具有与其他洗脱物相似的DPPH清除能力(SC50=0.08±0.01 mg/mL),优于其他洗脱物的α-糖苷酶抑制活性(IC50=0.98±0.01 mg/mL),该部分洗脱物是百香果果皮的活性多酚富集物。建立了百香果果皮活性多酚总酚、总黄酮含量测定方法,四川产地总酚、总黄酮含量为 20.51±0.56 mgGAE/g DW 和 20.97士0.75 mgRT/g DW,广西样品为 20.15±2.20 mgGAE/g DW 和 17.76±0.48 mgRT/g DW,福建测得量分别为15.89±0.57mgGAE/g DW 和 17.53±1.91 mgRT/g DW。通过 LC-MS 技术从三地样品中共推测出9种化合物,分别为鞣花酸(1)、3,4’,7-三羟基黄酮(2)、芥子酸-O-己糖(3)、异荭草素(4)、荭草素(5)、Derhamnosylmaysin(6)、牡荆素(7)、5-羟基-2-(4-羟基-3-甲氧苯基)-3-甲氧基-7-((3-甲基-2-丁烯-1-基)氧代)-4H-苯并吡喃-4-酮(8)和芦丁(9)。其中鞣花酸(1)和芥子酸-O-己糖(3)是四川产地样品特有成分,鞣花酸(1)、芥子酸-O-己糖(3)以及Derhamnosylmaysin(6)是首次在我国紫皮百香果果皮中被检测到。进一步定量结果显示,荭草素含量为0.79±0.05-0.33±0.04μgOR/g DW,牡荆素含量为0.16±0.01-0.04±0.01 μgⅥ/g DW,芦丁含量为 9.01±1.05-5.03±0.33 μgRT/g DW,其中四川产地样品中3种代表化合物相对含量均较高。采用4种抗氧化和2种降血糖实验初步评价了我国三产地百香果果皮活性多酚的体外生物活性。三产地样品均显示出一定的DPPH自由基清除能力(SC50=57±0.01-102±0.03 μg/mL)、ABTS 自由基清除能力(0.97±0.02-0.74±0.02 mmol TE/g)、FRAP 还原能力(0.71±0.04-0.34±0.03 mmol Fe2+/g)和 β-胡萝卜素-亚油酸法测定抗氧化活性(IC50=4.99±0.40-7.39±0.64mg/mL),同时表现出了优良的α-糖苷酶抑制活性(IC50=0.98±0.01-1.14±0.14 mg/mL和α-淀粉酶抑制活性(IC50=0.28±0.04-0.46±0.02mg/mL),数据表明相对其他样品,四川产地样品抗氧化和降血糖活性最好。通过数据相关性分析,总酚含量是三产地样品发挥抗氧化和降血糖活性的物质基础,芦丁是活性多酚的关键化合物。综上,三产地百香果果皮中活性多酚类化合物,在化合物种类、含量以及生物活性方面均存在差异。产地对于多酚种类与含量具有较大影响。本论文研究结果可进一步指导百香果果皮资源科学合理的开发,推动我国百香果果皮的精准化利用。
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