【研究背景】：　　卒中严重降低了人类的生活质量，并给社会带来了恶劣的影响，缺血性脑卒中为最常见的病发类型。相比之下，女性的生命周期较长，因此女性的脑卒中发病比例要高于男性，专家预测，截止到2050年，脑卒中的发病率女性将比男性高出三十个百分点。同时，女性独特的生理因素，导致中老年的女性发生卒中后，社会活动能力更差，个人生活更加困难。　　随着2003年人类基因组测序工作的完成，世界各国科学家逐渐把注意力投入到遗传学的研究，而缺血性卒中与表观遗传学之间一直为热点研究。其中，X染色体失活是表观遗传学的重要组成部分，并已经证实与多种人类疾病相关联。X染色体失活包括倾斜性失活和随机性失活，本课题将对比缺血性卒中患者与正常人群的X染色体失活情况，探索X染色体失活与女性缺血性卒中是否存在关联，如果存在关联，哪种失活与缺血性卒中的关联性有意义，从而达到对女性缺血性卒中的危险因素的研究及预防目的。　　在研究X染色体失活与缺血性卒中的同时，选取一例伴有家族史卒中史且已证实X染色体随机性失活的缺血性卒中女性患者的血液，从外周淋巴细胞诱导为多能干细胞，并研究细胞诱导前后的X染色体失活情况。　　【目的】：　　1.X染色体倾斜性失活与女性缺血性脑卒中的相关性研究。　　2.建立女性缺血性卒中的诱导多能性干细胞系,为阐述缺血性卒中的发病机制、临床治疗及药物筛选做铺垫。　　3.诱导前后的X染色体失活状态研究。　　【方法】：　　1.收集女性缺血性脑卒中新发病例组及健康对照组外周血标本各60例，从血液标本中进行DNA提取，运用基因片段方法对其进行杂纯合子分析。在杂合子人群中，分别对实验组和对照组的样本行甲基化处理，随后对其MS-PCR，最后，运用ABI3100基因分析仪判断失活类型。　　2.使用含四因子的仙台病毒转染人外周血淋巴细胞,建立诱导性多能干细胞(human peripheral blood mononuclear cells induced pluripotent stem cells， hPBMC-iPSCs),并且从基因表达、体内分化能力和分化核型等不同方面进行检测。对hPBMC-iPSCs提取DNA，并运用方法1，对其失活状态进行检测。　　【结果】：　　1.女性缺血性卒中组和健康人群组对比发现，两者基因的纯合子发生率近似，而X染色体倾斜性失活卒中组明显升高。　　2.建立了1株女性缺血性卒中的hPBMC-iPSCs，所建立的hPBMC-iPSCs在体外能维持自我更新和多能性的状态,可表达多能标志基因,在体外长期培养能维持正常核型，在体内、体外均可向三个胚层分化。　　3.诱导后的多潜能干细胞由诱导前的X染色体随机失活变为倾斜性失活。　　【结论】：　　1.女性缺血性卒中发病率与X染色体倾斜性失活有明显关联性，为预测女性卒中的发生提供了相关证据。　　2.以四因子作为诱导基因，通过仙台病毒转录技术，成功将人外周血中淋巴细胞在体外诱导成iPS细胞。　　3.对iPS的生物学鉴定显示，iPS细胞在形态学、内源性基因表达量、AP染色、分化潜能方面均类似于ES细胞。　　4.诱导多潜能干细胞保留了X染色体失活，但失活性质会发生特殊改变。