【摘 要】
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目的本研究将壳聚糖/羟基磷灰石支架与载辛伐他汀的PLGA微球相复合(SIM/PLGA/CS/HA),以期构建一种具有局部缓释辛伐他汀功能的仿生组织工程支架。该SIM/PLGA/CS/HA支架在体内
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目的本研究将壳聚糖/羟基磷灰石支架与载辛伐他汀的PLGA微球相复合(SIM/PLGA/CS/HA),以期构建一种具有局部缓释辛伐他汀功能的仿生组织工程支架。该SIM/PLGA/CS/HA支架在体内外都有很好的促骨再生效果,为临床应用载辛伐他汀组织工程支架修复骨缺损提供了理论支持和实验依据。材料与方法联合应用乳化溶剂挥发法和冻干技术制备SIM/PLGA/CS/HA支架。使用电镜观察支架的表面形态并利用紫外分光光分度法检测支架中药物的缓释速率。分别利用CCK8法和死活细胞染色检测接种在支架上的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的细胞增殖和细胞活性。利用碱性磷酸酶定量分析,RT-q PCR和茜素红染色检测支架对BMSCs成骨分化的影响。通过大鼠颅骨缺损模型评估SIM/PLGA/CS/HA支架的体内成骨活性。结果SIM/PLGA/CS/HA支架为层状多孔结构,PLGA微球与支架基质紧密的结合在一起。支架中的SIM能够以稳定的速率持续释放,释放时间达30天以上。CCK8检测显示,在实验的1,3天,HA/CS组,PLGA/HA/CS组和SIM/PLGA/CS/HA组的细胞数量无差异;在第7,11天,SIM/PLGA/CS/HA组的细胞数量显著高于其他两组。死活细胞染色显示,HA/CS组,PLGA/HA/CS组和SIM/PLGA/CS/HA组中的细胞均有良好的活性,较少出现凋亡。在第14天,SIM/PLGA/CS/HA组中骨唾液酸基因(BSP),骨桥蛋白基因(OPN),Runt相关转录因子2(RUNX2),骨钙素基因(OCN)均显著高于HA/CS组和PLGA/HA/CS组。此外,SIM/PLGA/CS/HA组的ALP活性和钙沉积也显著高于其他实验组。体内大鼠颅骨缺损修复实验也证明SIM/PLGA/CS/HA支架可以显著促进骨再生。结论本实验成功制备出一种能够缓释SIM的壳聚糖/羟基磷灰石支架,这种新型支架可以显著地促进BMSCs的增殖和成骨分化,促进体内骨再生,具有广阔的临床应用前景。
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