食管鳞状细胞癌中WIF-1基因启动子区甲基化状态及mRNA表达的研究

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目的:探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC )及癌旁组织中Wnt抑制因子-1 ( Wnt inhibitory factor-1, WIF-1 )启动子区甲基化状态及mRNA表达水平并研究其与临床病理指标之间的关系。方法:1应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR, MSP)技术检测62例ESCC组织及30例癌旁组织中WIF-1基因启动子区甲基化状态,研究DNA甲基化在食管癌发生发展中的作用,及其与临床病理学指标之间的关系。2应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测WIF-1基因mRNA在62例ESCC组织及30例癌旁组织中的表达水平,研究mRNA的相对表达量在ESCC组织及癌旁组织中的表达差异及其与临床病理学指标之间的关系。3综合分析ESCC组织中WIF-1基因启动子区甲基化情况与mRNA相对表达量之间的关系,研究甲基化与mRNA表达异常的关系。4运用统计软件SPSS 13.0探讨其与临床病理资料的关系,并对数据进行统计学分析。结果:1 WIF-1基因在癌组织中甲基化率59.7% (37/62)明显高于其相应的癌旁组织13.3% (4/30),(P <0.05)。2 WIF-1基因甲基化与ESCC组织临床病理学资料之间的关系:甲基化率在年龄≥61岁组75.86% (22/29)明显高于<61岁组45.45% (15/33);病理学分级I-II级52.94% (27/51)明显低于III级90.91% (10/11);淋巴结转移组85.71% (12/14)明显高于无淋巴结转移组52.08% (25/48),差异均有统计学意义(P <0.05)。甲基化率在男性75.86% (28/44)高于女性50% (9/18);肿瘤位于下段71.43% (5/7)高于上段33.33% (1/3)及中段61.54% (31/52);肿瘤浸润至肌层组甲基化率72.73% (8/11)高于浸润至粘膜下层组40% (6/15)和浸润至外膜及周围组织组63.89% (23/36);临床分期IV期组甲基化率为77.78% (7/9)高于0-I期组40% (6/15),II期组61.76% (21/34),III期组75% (3/4),经统计学分析(P >0.05)。3 WIF-1基因mRNA ESCC组表达量(0.565±0.112)显著低于癌旁正常组(0.666±0.107),经统计学分析(P <0.05)。4 WIF-1 mRNA在ESCC组织中表达情况与临床资料之间的关系:病理学分级I-II级组mRNA相对表达量(0.580±0.112)明显高III级组的表达量(0.498±0.083),经统计学分析差异有意义(P <0.05)。WIF-1 mRNA相对表达量女性(0.587±0.107)高于男性(0.557±0.113);<61岁组(0.569±0.105)高于≥61岁组(0.561±0.121) ;肿瘤位于上段组(0.587±0.064)高于中段(0.563±0.109)及下段(0.572±0.152);淋巴结无转移组(0.569±0.111)高于有转移组(0.550±0.118);肿瘤浸润至粘膜下层组(0.597±0.110)高于浸润至肌层组(0.510±0.110)及浸润至外膜及周围组织组(0.569±0.109);临床分期0-I期组表达量(0.597±0.110)高于II期组(0.552±0.113),III期组(0.663±0.117),IV期组(0.520±0.081);经统计学分析无意义(P >0.05)。5 WIF-1基因在甲基化阴性的ESCC中mRNA相对表达量(0.593±0.101)高于甲基化阳性的ESCC组织(0.547±0.116),经统计学分析无意义(P >0.05)。结论:1食管鳞状细胞癌组织甲基化率59.7% (37/62)明显高于癌旁组织13.3% (4/30),经统计学分析有意义(P <0.05),提示食管癌发生过程中可能存在着WIF-1基因甲基化。2 WIF-1基因甲基化在ESCC组织中临床病理学资料方面的研究结果提示WIF-1表达与年龄、病理学分级、淋巴结转移相关,而与临床分期、部位、性别等无关。3 WIF-1基因mRNA ESCC组表达量(0.565±0.112)显著低于癌旁正常组(0.666±0.107),经统计分析差异有意义(P <0.05),提示WIF-1基因mRNA表达异常可能与ESCC的发生有关。4 WIF-1基因mRNA在ESCC组织中表达与临床病理学资料之间的研究结果提示WIF-1表达与癌组织病理学分级相关,而性别、年龄、临床分期、淋巴结转移等无关。5 WIF-1基因在甲基化阴性的ESCC中mRNA相对表达量(0.593±0.101)明显高于甲基化阳性者(0.547±0.116),差异无统计学意义(P >0.05)。研究结果提示DNA甲基化可能不是导致mRNA表达异常的主要原因,此基因甲基化与mRNA表达两者之间的关系有待进一步研究。
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