【摘 要】
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背景:结直肠癌（Colorectal Cancer）是在临床上较为常见的消化系统恶性肿瘤之一,在我国它的发病率位居第三位和死亡率位居第五位,并且呈现出逐年上升的趋势。尽管目前在临床上已经有较为系统的治疗方案来针对结直肠癌,如手术切除、放化疗等,但其耐药性及较强的副作用严重降低了患者生存率和生存质量。木兰花碱（Magnoflorine,Mag）属于阿朴菲类生物碱,广泛存在于防己科等要用植物中,具有抗
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背景:结直肠癌（Colorectal Cancer）是在临床上较为常见的消化系统恶性肿瘤之一,在我国它的发病率位居第三位和死亡率位居第五位,并且呈现出逐年上升的趋势。尽管目前在临床上已经有较为系统的治疗方案来针对结直肠癌,如手术切除、放化疗等,但其耐药性及较强的副作用严重降低了患者生存率和生存质量。木兰花碱（Magnoflorine,Mag）属于阿朴菲类生物碱,广泛存在于防己科等要用植物中,具有抗氧化、降血糖及抗肿瘤等药理作用。有研究表明,木兰花碱能够抑制胃癌进展并通过AKT/m TOR和p38信号通路提高乳腺癌细胞对阿霉素的药物敏感性。但其在结直肠癌中的作用尚不明确。目的:研究木兰花碱对结直肠癌细胞SW480抑制作用的机制研究,探讨木兰花碱在结直肠癌演进过程中的作用机制,为木兰花碱在临床上对结直肠癌的治疗应用提供理论和实验依据。材料与方法:体外实验:1.应用不同浓度的木兰花碱（0、10、20、40μmol/L）处理结直肠癌细胞SW480;2.应用CCK-8实验检测结直肠癌细胞sw480活性变化;3.采用球体形成实验检测结直肠癌细胞sw480球体形成的数量以及大小;4.应用免疫荧光实验检测干细胞标志物的特异性蛋白CD133的表达;5.采用葡萄糖及乳酸试剂盒,通过比色法检测细胞内有氧糖酵解水平;6.应用流式细胞术检测结直肠癌细胞sw480内活性氧（ROS）水平的相关变化趋势;7.通过蛋白免疫印迹实验（Western blot）检测KRAS/AMPK相关通路中特异性蛋白的表达情况。结果:1.木兰花碱抑制SW480细胞的活性:CCK-8实验结果显示,木兰花碱显著抑制SW480细胞的活性（P＜0.01）。2.木兰花碱抑制SW480细胞的成球能力:球体形成实验结果显示,随着药物浓度的增加,SW480细胞的大小和数量均下降（P＜0.01）。3.木兰花碱抑制SW480细胞的CD133蛋白的表达:球体免疫荧光实验结果显示,SW480球体细胞的荧光强度随着木兰花碱药物浓度的增加而减弱。4.木兰花碱抑制SW480细胞的有氧糖酵解:葡萄糖及乳酸试剂盒实验结果显示,葡萄糖摄取及乳酸生成能力与木兰花碱呈浓度梯度依赖,均随着药物浓度的增加而下降（P＜0.01）。5.木兰花碱抑制SW480细胞内ROS水平:流式细胞术实验结果显示,木兰花碱可降低SW480细胞内ROS水平（P＜0.01）。6.木兰花碱通过降低ROS水平抑制SW480细胞的KRAS/AMPK通路相关蛋白:Western blot实验结果显示,活性氧诱导剂（RA）和木兰花碱联合处理后,KRAS和p-AMPK表达水平均升高（P＜0.05）。结论:木兰花碱通过ROS/KRAS/AMPK通路抑制结直肠癌细胞SW480的增殖和有氧糖酵解,进而抑制结直肠癌的进展。
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