论文部分内容阅读
[目的]探讨Twist在低氧诱导的宫颈癌EMT发生中的作用及可能机制,为宫颈癌靶向治疗,提高宫颈癌治疗效果提供实验依据。[方法]免疫组化法检测中、晚期宫颈癌组织微阵列芯片78例组织标本HIF-1α、 Twist和Vimentin表达,探讨其与临床病理特征关系及它们之间的相关性。以二氯化钴(CoCl2)处理Hela细胞模拟细胞低氧微环境,并采用MTT法检测细胞的增殖活力,筛选CoCl2的最适作用浓度及作用时间；倒置显微镜观察低氧处理6h后细胞的形态特征；划痕实验检测低氧处理6h后细胞迁移能力的变化；细胞免疫荧光法检测低氧处理6h后细胞的HIF-1α、Twist、Vimentin蛋白表达及相互间的关系。[结果](1)78例宫颈癌组织中HIF-1α、twist和vimentin的阳性表达率分别为54/78(69.2%)、56/78(71.8%)和30/78(38.5%)。HIF-1α、vimentin在宫颈癌组织中表达与患者年龄无关(P>0.05),Twist在宫颈癌组织中表达与年龄有关,其在小于50岁的患者中的表达显著高于50岁以上年龄组患者的表达(P<0.05)；HIF-1α、Twist和vimentin三个指标在宫颈癌组织中的表达均与肿瘤组织学类型、FIGO分期、淋巴转移、分化程度密切相关,随着FIGO分期的变晚、淋巴转移的出现、分化程度的降低HIF-1α、Twist和vimentin的表达均逐渐增高(P<0.05)。(2) CoCl2对Hela细胞具有显著的增殖抑制作用,且呈浓度、时间依赖性,为模拟低氧微环境采用的CoCl2最适作用浓度为150μmol/L,最适作用时间为6h(P<0.05)。(3)低氧使Hela细胞逐渐获得了间质细胞的形态特征,150μmol/L的CoCL2处理Hela细胞6小时后,倒置显微镜观察显示Hela细胞发生明显的间质细胞形态改变,突起也变得更长更细,细胞间的空隙增加；划痕实验结果显示低氧组细胞迁移能力显著增强(p<0.05)。(4)低氧6h后,Hela细胞HIF-lα、Twist、Vimentin表达较常氧组显著增高(P<0.05),且HIF-lα、Twist、Vimentin之间互相呈正相关(P<0.05)。[结论]Twist可能通过HIF-lα-Twist-Vimentin途径,上调Vimentin表达在低氧诱导的宫颈癌EMT发生中起到关键作用。