改良成年犬骨骼肌成肌细胞培养鉴定及生物学特性研究 目的：探讨更为简便、经济的成年犬骨骼肌成肌细胞体外培养、鉴定方法及其生物学特性。 方法：采用机械法结合IA型胶原酶与胰蛋白酶的二步酶消化法获取大量骨骼肌成肌细胞进行体外原代与传代培养；观察细胞形态，通过细胞生长曲线研究其增殖能力；免疫细胞化学染色鉴定；对差速贴壁纯化及未差速贴壁纯化的细胞进行细胞组织化学染色，比较其阳性率的差异。 结果：机械法结合二步酶消化法适于获取成年犬骨骼肌成肌细胞；细胞生长旺盛，在分化培养基作用下可融合成肌管；α-横纹肌肌动蛋白、肌球蛋白细胞组织化学染色，骨骼肌成肌细胞为阳性，而肌管为强阳性。肌浆蛋白细胞组织化学染色，骨骼肌成肌细胞为阳性；各组细胞α-横纹肌肌动蛋白免疫细胞化学染色阳性率无显著差异。 结论：机械法结合二步酶消化法获得的骨骼肌成肌细胞具有良好的增殖、分化能力；使用本方法，省略差速贴壁过程同样可以获得较高纯度的成肌细胞。 成年犬骨骼肌成肌细胞自体移植于急性心肌梗死区域的实验研究 目的：通过心肌内和冠状动脉内注射法移植自体骨骼肌成肌细胞到急性心肌梗死区后的生长分化特点。 方法：采用机械法结合IA型胶原酶与胰蛋白酶的二步酶消化法获取自体骨骼肌成肌细胞进行体外培养；结扎犬冠状动脉前降支中段建立急性心肌梗死模型；在不开通冠状动脉的情况下分别通过心肌内直接注射和梗死相关冠脉内注射两种途径向梗死区内进行自体骨骼肌成肌细胞(1.0～1.4×10~8个)移植并分别设置对照组(共4组，每组5只)；4周时处死动物，在梗死区内取材。通过HE染色、PTH染色、骨骼肌特异性慢肌球蛋白抗体免疫组化染色及透射电镜寻找梗死区内存在新生肌组织的证据并观察其生长特点。 结果：梗死区经心肌内直接注射和冠脉内注射移植自体骨骼肌成肌细胞4