花特异表达启动子、转录因子的克隆及其转化百合的研究

来源 :华南热带农业大学 海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ruguofengdiao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
百合花姿雅致,青翠娟秀,花茎挺拔,是点缀庭园、盆栽与切花的名贵花卉。本研究主要集中在百合花色花型的改良上。第一部分的研究是以拟南芥基因组DNA为模板,利用PCR技术获得了特异扩增产物,通过DNAman进行序列分析表明:该DNA片段全长531bp,与文献报道的PCHS启动子有99%的同源,含有四个花特异表达的调控元件。将PCHS启动子代替pBI121上的CaMV35S启动子构建瞬时表达载体,农杆菌介导法侵染矮牵牛的花、茎、叶、根。GUS瞬时表达结果在花上出现较深的蓝色,在茎上的蓝色很浅,在根和叶中不显蓝色,初步确定该启动子具有较强的花特异表达活性。第二部分的研究是以康乃馨为材料,提取花瓣组织总的RNA,通过RT-PCR,克隆得到一个编码花特异转录因子CMB2,全长637bp,与文献报导的序列有98%的同源。经G分析,CMB2编码204个氨基酸,含有一个完整的阅读框,一个非常保守的MADS结构域以及一个保守的K-box结构域,为一个MADS-box基因。将花特异表达启动子PCHS分别与花色基因Hf2、花特异转录因子CMB2构建植物表达载体pPCHf、pPCCM,将组成型启动子CaMV35S与花特异转录因子CMB2构建植物表达载体pCM。通过农杆菌介导,采用叶盘法将目的片段转化百合植株,在含有G418的选择培养基上诱导转化百合植株生根,对生根植株进行PCR检测,对PCR扩增呈阳性且与阳性对照片段大小一致的植株进一步作PCR-Southern检测,表明目的片段已经整合到百合植株基因组中。转基因植株的获得,将为以后利用花特异表达启动子、花特异转录因子以及花色基因转化其它名贵花卉,培育花卉新品种、改良花卉品质、提高花卉观赏价值提供科学依据,并打下良好的基础。
其他文献
巴戟天(Morinda officinalis How)为茜草科多年生植物,其根具有补肾壮阳,强筋健骨的功效。由于野生资源枯竭,近年来开始人工栽培。过去巴戟天的繁殖方法均是采用无性繁殖(扦
为了探讨麻痹性贝毒在紫贻贝(Mytilus edulis)体内的降解情况,于2009年4月中旬在大连市大窑湾海域采集640只紫贻贝在实验室条件下进行人工解毒试验。结果表明:实验第0 d时紫
Coal fly ash (CFA) and municipal sewage sludge (MSS) management is a great conce worldwide.An alteative gaining high interest,is their use in agriculture and fo
对包括马铃薯四倍体、普通栽培种及其双单倍体和野生二倍体马铃薯在内的15个品种及品系进行了花药培养试验,其中20个材料分别在3种不同培养基上产生了胚状体。诱导马铃薯产生
This study selected the Dunhuang city with the unique landscape patte,its oasis surround by desert,for studying the vegetation change.Based on two period GaoFen
开展批评,进行舆论监督,是新闻的重要职能,也是提高新闻可读性的不可缺少的手段。鞭挞社会上的不正之风,为群众说话,读者自然是爱看的,但是,批评的内容,首先要做到事实确凿
Coalbed gas extraction is an important means of exploiting and utilizing gas resources,as well as a means of preventing coal mine disasters.In view of the low g
旱稻具有耐旱、耐瘠、适应性广等特点,是水稻抗旱性改良育种的巨大宝贵种质资源。推广旱稻种植面积或利用旱稻资源培育高产优质的旱稻品种(或抗旱水稻品种)是发展节水型农业的有效措施和手段,也是减少旱灾危害、解决粮食危机的重要途径;对于解决我国水资源短缺更是具有重要的意义。本研究对35份旱稻种质的主要农艺性状、主要品质性状和抗旱性指标采用方差、协方差以及多元统计分析等方法进行了广义遗传力、简单相关、遗传相关
本试验于2008年早季在农学院教学试验农场进行,以两系超级杂交稻培杂泰丰和华优179为材料,研究施氮量与控水措施对超级稻抗倒能力、产量和品质的影响。旨在通过控水措施与氮素
对甘蔗亲本种崖城斑茅2号和甘蔗材料崖城96-46(热带种×斑茅)进行核型分析。崖城斑茅2号的染色体核型公式为2n=60=60m,绝对长度为2.26~5.43μm,相对长度为2.26~5.43,平均臂比值为1.19,都是中部着丝粒染色体,核型为1B。崖城96-46的染色体核型公式为2n=68=66m(sat)+2sm,染色体绝对长度为1.83~5.48μm,相对长度为1.53~5.15,平均臂比值为