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背景妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)是临床上最常见的孕晚期肝脏疾病,目前仍然没有有效的治疗方法。大量流行病学研究和动物实验表明,ICP与不良妊娠结局相关。孕晚期给予雌二醇处理常被用于诱导发生动物胆汁淤积,本研究利用该方法建立ICP模型。奥贝胆酸(Obeticholic acid,OCA)是目前临床试验中用于治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物,也是FXR的合成激动剂。然而,OCA对雌二醇诱发ICP导致胎儿宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)的影响尚未有报道。目的本研究在于阐明奥贝胆酸(Obeticholic acid,OCA)预处理能否保护小鼠孕期胆汁淤积诱发的胎鼠IUGR,并探讨其机制。方法ICR小鼠在孕12天(gestation day 12,GD12)分成4组:对照组、E2处理组、OCA处理组和OCA+E2组。对照组GD12到GD17早8点给予空白溶剂植物油进行灌胃处理,OCA处理组和OCA+E2组同时间内给予OCA(5mg/kg)灌胃处理,E2处理组和OCA+E2组GD13到GD17每天早9点给予E2(0.625mg/kg)皮下注射。所有孕鼠在GD18早9点剖杀,记录活胎、死胎和吸收胎数;称量子宫连胎重、活胎仔体重和胎盘重,测量胎鼠顶臀长;记录妊娠结局和出生结局;使用自动生物分析仪检测母体血清总胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平。计算胎鼠宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)发生率。称量并收集孕鼠肝脏、胎鼠肝脏和胎盘用以检测还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,使用于免疫印迹和半定量PCR实验检测胎盘功能、发育和氧化应激发生情况。结果孕晚期给予E2处理后可引起胆汁淤积,而OCA可减轻E2引起的胆汁淤积。根据血清生化指标显示,E2处理后小鼠血清胆汁酸水平和转氨酶水平均升高,表明建模成功。OCA几乎完全抑制了E2诱导的TBA、ALT和AST水平的升高。E2处理后,母鼠的肝脏重量和肝脏系数显著增加。此外,OCA显著减弱E2诱导的肝细胞坏死,肝索排列紊乱和细胞质疏松。通过观察胎鼠的出生结局,我们发现E2处理后,胎鼠体重和顶臀长明显减少,胎鼠IUGR发生率增加,而OCA可以显著缓解ICP诱发的IUGR发生,但不能改善胎鼠死亡。半定量PCR实验、免疫印迹和免疫组化实验结果均显示OCA可激活孕鼠肝脏、胎盘和胎鼠肝脏中的FXR及其下游靶基因。OCA处理后上调了BSEP,Mdr2和Mrp2的m RNA表达,下调了Cyp7a1和Cyp8b1 m RNA的表达。通过分析胎盘发育与功能情况发现,E2处理后胎盘迷路层血窦区面积明显减少,加用OCA后情况得到缓解。半定量PCR和免疫印迹实验结果显示,E2处理后胎盘中性氨基酸转运体Snat2 m RNA和蛋白水平均显著下调,加用OCA后被显著上调。此外,E2处理后小鼠胎盘组织GSH水平显著低于对照,而脂质过氧化水平显著高于对照;免疫印迹和免疫组化实验结果显示,E2处理后胎盘3-NT水平也显著高于对照组。OCA可减轻E2诱导的胎盘和胎儿肝脏GSH耗竭以及脂质过氧化,显著减轻E2诱导的胎盘蛋白质硝化作用。进一步研究发现,ICP可以上调胎盘NADPH氧化酶4(NOX-4)蛋白水平和下调两种抗氧化基因Prdx1和Prdx3的表达;OCA显著抑制了E2诱导的胎盘NOX-4蛋白的增加和Prdx1基因表达的下调。此外,多方面的实验结果均显示OCA可以激活小鼠胎盘的Nrf2-Keap1抗氧化信号通路。OCA组和OCA+E2组的小鼠中,胎盘迷路区的滋养层单核巨细胞中具有强Nrf2免疫反应性。此外,胎盘Nrf2的抑制蛋白Keap1在E2处理的小鼠中显著增加,而在OCA+E2处理的小鼠中显著降低。经E2处理的小鼠胎盘中HO-1蛋白水平显著降低,加用OCA后被显著上调。结论E2诱发的ICP导致胎鼠死亡和IUGR。OCA预处理可激活胎盘和肝脏的FXR信号转导。此外,OCA预处理通过抑制胎盘氧化应激和维持胆汁酸稳态以防止ICP诱发的胎盘功能障碍和胎鼠IUGR。