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实验一P53在缺血再灌注导致急性肾损伤小鼠肾脏的表达目的：探讨缺血再灌注致急性肾损伤(AKI)小鼠肾脏不同部位p53的表达及细胞凋亡的变化。方法：采用随机对照动物实验方法,将12只小鼠随机分为两组：假手术组和AKI组,每组6只。采用双侧肾蒂夹闭45 min后松开动脉夹的方法建立小鼠AKI模型,于建模后48 h采血检测尿素氮、肌酐,取肾脏组织行HE染色观察肾组织病理学变化,采用Western Blot法测定p53蛋白含量,免疫荧光法确定肾脏不同部位p53的表达,TUNEL法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化方法检测TNFR、Caspase-3及Bcl-2蛋白水平。结果：(1)AKI组小鼠血尿素氮和肌酐水平均明显高于假手术组(P<0.01)；HE染色显示假手术组肾组织细胞形态完整,排列整齐,无明显病理改变,AKI组则表现为肾小管上皮细胞刷状缘脱落、空泡及滴状变性,皮髓质间有明显淤血带；(2)p53在假手术组小鼠肾脏无表达,而AKI组小鼠缺血再灌注48h后p53蛋白则明显增加(P<0.05),并且主要在肾皮质表达；(3)假手术组小鼠肾脏未检测到凋亡细胞,AKI组小鼠肾脏凋亡细胞指数明显增加(P<0.01)；TNFR蛋白及Caspase-3蛋白水平升高(P<0.01),Bcl-2蛋白水平下降(P<0.01)。结论：急性肾损伤时,肾组织p53表达增加,主要定位于皮质,并可能参与介导细胞凋亡实验二急性肾损伤小鼠肾脏P53表达与细胞凋亡的关系目的：探讨缺血再灌注致AKI小鼠肾脏p53的表达与细胞凋亡的关系。方法：采用随机对照动物实验方法,将18只小鼠随机分为三组：假手术组、AKI组及PFT-α组,每组6只。采用双侧肾蒂夹闭45 min后松开动脉夹的方法建立小鼠AKI模型,PFT-α组于建模前5 min腹腔注射p53抑制剂(PFT-α)2.2mg/kg,并于建模后48 h采血检测尿素氮、肌酐,取肾脏组织行HE染色观察肾组织病理学变化,采用Western Blot法测定p53蛋白含量,TUNEL法检测肾脏细胞凋亡免疫组化方法检测(?)TNFR、Caspase-3及Bcl-2蛋白水平。结果：(1)PFT-α组和AKI组小鼠血尿素氮、肌酐水平均明显高于假手术组,而PFT-α组与AKI组比较血尿素氮、肌酐水平明显降低(P<0.01)；肾组织HE染色显示AKI组肾小管上皮细胞刷状缘脱落、空泡及滴状变性,皮髓质间有明显淤血带；PFT-α组肾小管上皮部分刷状缘脱落消失,空泡及滴状变性减轻,皮髓质间无明显淤血带；(2)与AKI组相比,PFT-α组小鼠肾脏p53蛋白含量减少(P<0.01),凋亡细胞指数也明显减少(P<0.01); TNFR蛋白及Caspase-3蛋白水平也明显降低(P<0.01), Bcl-2蛋白水平升高(P<0.01)。结论：急性肾损伤时,p53可能通过调控凋亡蛋白Bcl-2.、TNFR蛋白水平,促进Caspase-3的释放,从而介导细胞凋亡。