氨化学发光换能器在生物传感技术中的应用研究

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化学发光生物传感器灵敏度高、选择性好、设备简单,已经成为分析化学工作者研究的热点之一。本论文在研制高灵敏氨化学发光换能器的基础上,提出了化学发光传感器测定L-谷氨酰胺和L-谷氨酸的新方法;发现了N-溴代丁二酰亚胺-二氯荧光素-尿素(NBS-DCF-尿素)的后化学发光体系,并详细探讨了该体系的反应机理。该研究对于拓展化学发光传感器理论体系,丰富化学发光分析的研究内容有一定的意义。全文共分三章,主要内容如下:1.综述了化学发光换能器的研究进展情况,介绍了本论文的研究内容和意义,引用文献120篇。2.基于NBS-DCF的后化学发光体系,建立了高灵敏的氨后化学发光换能器。该换能器的线性范围是3.0×10-11-1.0x10-7 g/mL,检出限为1×10-11 g/mL,对1.O×10-9 g/mL NH4+:溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为1.4%。将该化学发光换能器用于实际水样中NH4+的测定,结果与比色法一致。3.以猪肾中的谷氨酰胺酶为分子识别元件,基于NBS-DCF-NH4+的化学发光换能器,构建了L-谷氨酰胺化学发光组织传感器。该传感器的线性范围是6.0×10-8-1.0×10-5 g/mL,检出限为2.O×10-8 g/mL,对浓度为5.O×10-7 g/mL L-谷氨酰胺标准溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为2.1%。该法具有简便、稳定、灵敏度高的特点。该传感器用于人体血浆样品中L-谷氨酰胺含量的测定,加标回收试验表明,结果令人满意。4.以戊二醛为交联剂,将谷氨酸脱氢酶(GLDH)固定在蛋壳膜上制得了新型的流通式化学发光谷氨酸传感器,探讨了其响应机理。该传感器的线性范围为:8.O×10-7-8.0×10-9 g/mL,检出限为3×10-9 g/mL,对浓度为5.O×10-8 g/mL L-谷氨酸标准溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为1.8%。该该传感器被成功应用于人体血浆样品中L-谷氨酸含量的测定。5.探讨了NBS-DCF-尿素后化学发光反应体系的反应机理,提出了测定尿素的流动注射化学发光新方法。该法测定尿素的线性范围是2.O×10-9-1.0×10-6 g/mL,检出限为7×10-10 g/mL,对浓度为5.0×10-8 g/mL尿素标准溶液进行11次平行测定的相对标准偏差为1.3%。此法已用于牛奶样品中尿素含量的测定,结果与比色法一致。
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