目前商业化的裂解流感疫苗或亚单位流感疫苗在应用于婴幼儿或老年人群时其有效性会只有60％-90％,而这些人群流感发生机率相对较高。为了更有效的提高疫苗的可靠性,需要采取一些有效的措施来提高裂解流感疫苗或流感病毒亚单位疫苗的免疫原性。其中,能够减少流感疫苗使用量的有效佐剂,最有希望在流感高发季节,疫苗供不应求时起到其他措施无与伦比的功效和作用。 在过去多年中,科学工作者和疫苗开发商长期致力于开发这类理想的有效疫苗佐剂,取得了一些进展,其中含胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸(CpG)的脱氧寡核酸链(CpG oligodeoxynucleotides, CpG ODN)便是最有希望的一类佐剂。在本研究中,通过分析CPG 7909、M362、CPG 10109和CPG 2395对人外周血单个核细胞的刺激效果,选取刺激效果较为均衡的CPG 10109进行进一步的动物实验。检验CPG10109对提高流感病毒亚单位疫苗免疫原性和有效减少疫苗使用量方面的佐剂效应,以及当以阳离子乳酸/羟乙酸共聚物(cPLGA)包裹流感病毒亚单位疫苗时,CPG 10109对流感病毒亚单位-cPLGA 纳米微球免疫功能的影响。免疫方法是：将流感病毒亚单位疫苗或疫苗包裹于cPLGA中,在加入或未加入CPG 10109 时,皮下免疫小鼠,四周和60天加强免疫一周后取血制备血清,取小鼠脾制备脾细胞悬液。在脾细胞培养中,加入回忆抗原(recall antigen),比较各组脾细胞增殖效果差异和分泌的γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)浓度,ELISA测定血清中血凝素特异性IgG1和IgG2a抗体滴度,从而比较各组疫苗的免疫原性以及CPG 10109的佐剂效应。 实验结果表明,CPG 10109加入后,脾细胞增殖与IFN-γ分泌量显著增加。另外CPG 10109还显著提高了免疫小鼠中血凝素(hemagglutinin, HA)特异性IgG抗体水平。初次免疫四周后,HA特异性IgG1和IgG2a均有明显增长；加强免疫一周后,主要是IgG2a增长。在1/10剂量组中,以加入CPG 10109的流感疫苗与cPLGA包裹疫苗混合组效果最佳,IgG1水平接近于完全剂量组,IgG2a 高于完全剂量组。这表明CPG 10109作为佐剂,在小鼠模型上,对流感病毒亚单位疫苗具有显著增效作用,在一定程度上可降低流感疫苗的使用量,有望成为研制流感疫苗的新型佐剂。