禾谷镰孢菌侵染小麦胚芽鞘的分子策略

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jshldd1314
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
禾谷镰孢菌是属于子囊菌门的丝状真菌,有性态为玉蜀黍赤霉,是小麦和大麦穗腐病的主要致病真菌。全世界范围内,每年能导致上亿美元的经济损失。被禾谷镰孢菌感染的谷物种子缩小且含有脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮等毒素。其中脱氧雪腐镰刀菌烯醇因能够抑制蛋白质的合成而对人畜的健康产生威胁。尽管致力于寻找植物中针对禾谷镰孢菌的抗性基因,但是到目前为止,还没有培育出有效的抗性品种。了解禾谷镰孢菌在宿主体内的侵染过程和致病机理,将有助于寻找到新的抗赤霉病的靶位点。  使用荧光蛋白AmCyan标记的禾谷镰孢菌侵染小麦胚芽鞘,并跟踪观察侵染过程。禾谷镰孢菌在宿主体内的生长过程伴随着明显的形态变化:感染12小时,孢子萌发;16小时,菌丝细小(~4μm),顶端少有分支;40小时,菌丝变粗(~6μm),顶端出现大量分支;64小时,菌丝呈现不规则状;240小时,菌丝侵占小麦胚芽鞘,并有孢子产生。因此选择16、40和64小时作为禾谷镰孢菌侵染小麦胚芽鞘的三个代表性时期,运用激光显微切割技术和芯片杂交,获得这三个时期的全基因组表达谱。  通过与培养基上生长的禾谷镰孢菌表达谱进行比较,发现344个在宿主体内优先表达的基因。约有41%的基因编码分泌蛋白。其中编码植物细胞壁降解酶的基因在64小时显著上调表达,编码活性氧产生相关的蛋白、毒素蛋白的基因在64小时开始高表达。通过分析染色体上相邻位置基因表达的相关系数,发现新的可能编码次生代谢产物的基因簇FG354,其所包含的8个基因在64小时特异性高表达。此外还发现禾谷镰孢菌在侵染过程中,糖酵解途径显著下调,而乙醛酸循环相关基因在16小时显著上调表达。  选择性地进行单个基因的敲除,并对其致病力进行检测。选择编码植物细胞降解酶的基因CbhC1(纤维二糖水解酶,降解纤维素)和Eng1(β-1,3(4)-葡聚糖内切酶,降解半纤维素)、编码细胞表面蛋白的基因CFEM1、FG3_54基因簇中的3个基因(NPS9,FGSG_10992和FGSG_10995)和编码线粒体内膜上负责乙醛酸循环和三羧酸循环产物转运的基因CIC1,进行单个基因突变。突变体均呈现显著的致病缺陷。此外对编码KP4-like蛋白的3个基因进行RNA干扰,突变体侵染仅限于小麦胚芽鞘的伤口处。这些都验证芯片结果的可靠性,同时也在一定程度上为致病因子的筛选提供借鉴。  上述7个在小麦胚芽鞘上致病力显著下降的基因敲除突变体,有4个(△cfem1,△FGSG_10992,△FGSG_10995和△cic1)对小麦穗部的致病力也显著下降,而其余3个基因突变体致病力没有变化,预示着这3个基因是侵染小麦胚芽鞘而非穗部的致病因子。同时我们还获得禾谷镰孢菌侵染小麦穗部4个时期的表达谱,为全面阐述组织特异性的侵染策略提供基础。  总之,利用基因敲除和快速致病力检测的方法验证了部分基因的功能,发现新的可能编码次生代谢产物且与致病力相关的基因簇FG354,而且第一次发现并验证乙醛酸循环在禾谷镰孢菌侵染宿主时的作用。最终根据基因表达和侵染过程中真菌形态的变化,揭示禾谷镰孢菌从前期隐蔽侵入到后期彻底破坏宿主细胞的侵染策略。
其他文献
随着无线通信系统的应用变的广泛,对其多功能化与便携化的要求也逐渐增高。封装天线(AiP)技术能够通过将天线,IC芯片以及元器件集成于一个系统的方式提高封装密度和减小系统体积
酸敏感离子通道(ASICs)是一类由细胞外质子(H+)激活的阳离子通道,广泛分布于中枢和外周神经系统。近年来被证明与突触发育、神经可塑性、空间学习记忆、焦虑等生理过程和伤害
苦瓜作为一种常见的药食两用的植物,其降血糖活性早已得到广泛的认可并被动物实验和临床实验所证实。苦瓜降血糖成分主要分为皂苷和多肽两大类,其中降血糖多肽P早在20世纪九十年代已进行了分离纯化和药效研究,课题组前期研究中首次获得了降血糖多肽P的基因序列。本课题主要研究目标为:1在分子水平对不同苦瓜品种的降糖多肽P建立表达差异性研究系统;2根据建立的系统筛选优质的降血糖苦瓜品种。首先,为了获得优质的RNA
21世纪是信息技术空前发展的世纪,随着信息化的快速推进,通信在社会中的地位越来越重要。当前,随着对高速多媒体移动通信需求的不断增加,无线通信系统对宽带传输能力的要求也
极性材料(铁电、压电)光电效应是当前研究的热点之一。利用铁电、压电性对光伏效应的调控作用,可以开发具有特定功能和应用场景的器件,如信息存储、人机交互等。铁电材料的光电压可以超越带隙的限制,但是由于光电流密度较小,造成光电转换效率不高。人们一直在探索增强该类材料光伏性能的方法,希望使这类材料有望成为新型的光伏材料,并发展新的功能器件。而压电材料因为其压电效应,可以利用压电势来诱导PN结或金属-半导体
由于集成度高、体积小、成本低、重量轻、能耗低、惯性小等优点,MEMS(MicroElectroMechanicalSystem微机电系统)惯性器件在通信、军事、汽车电子等领域得到了广泛的推广与应用
本文是在汽车轮毂跳动仪的基础上,对轮毂跳动量测量系统进行研究。在对几种方案分析的基础上,选择了光栅传感器作为位移测量元件,比较莫尔条纹信号电子学细分的方法和分类,分
在能源短缺和环境污染日益严重的今天,作为可再生绿色能源的风能的开发利用具有十分重要的意义。随着风力发电机组容量的不断增大,提高运行效率、安全准确并网、最大程度地利用
目前,多种主要无线通信系统的工作频率范围覆盖了从400MHz到6GHz的多个频段。为了实现可以兼容多种无线通信体制的设备,宽带射频子系统是一个关键部件。本论文的研究内容来源于
鱼腥藻Anabaena sp.) strain PCC7120是一类原始的光合自养细菌。当环境中化合态氮源消失时,可以通过自身固氮作用利用空气中的氮气,而固氮酶遇到氧气会不可逆失活,于是鱼腥藻分