系统性硬化病肺间质病变外周血清生物标志物的研究

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目的:通过比较和分析系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)合并间质性肺病(interstitial lung disease,ILD)病人组肺间质病变程度、外周血清生物标志物及相关临床因素的关系,探索早期诊断系统性硬化症相关肺间质病变(SSc-ILD)外周血清生物标志物及其与SSc-ILD疾病程度的相关性。方法:选取厦门大学附属第一医院风湿免疫科2012.9-2017.6入组的符合美国和欧洲风湿病协会SSc初步标准的45例患者,同时选取原发性(primary Sjogren’s syndrome,pSS)干燥综合征患者69例以及44例类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者作为同步检测。患者年龄均大于18岁。留取患者血清标本,并行胸部高分辨率CT(high resolution CT,HRCT)以及肺功能(pulmonary function tests,PFTs)检查,包括用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、1 秒用力呼气量(forced expiratory volume in one second,FEV1)、1 秒用力呼气量/用力肺活量(FEV1/FVC)、一氧化碳弥散量(diffusing capacity for carbon monoxide of lung,DLCO)。依据每例患者HRCT中ILD病变范围、特征及程度,将患者分为ILD 0,1,2,3级。同时记录患者临床信息:疾病病程,吸烟史,用药情况,临床呼吸困难评分。采用多重酶联免疫吸附试验(Multiple Enzyme-linked Immunosorbent Assay,Elisas)、化学发光酶免疫分析(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA)和Luminex-Xmap技术检测所有患者血清标本中与ILD发生发展密切相关的42种细胞因子/趋化因子、基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)、涎液化糖链抗原6(krebs von den lungen-6,KL-6)的血清水平。比较这些细胞因子水平在不同疾病不同ILD病变程度中的差异。使用线性回归方法进行数据分析,在多重比较中,错误发现率(false discovery rate,FDR)意义为错误拒绝(拒绝真的(原)假设)的个数占所有被拒绝的原假设个数的比例的期望值,即被用来调整p值以获得出错率,我们根据FDR小于0.10定义为显著关联。结果:KL-6、C-X-C motif chemokine 10/interferon gamma-induced protein 10(CXCL10/IP-10)、血清嗜酸细胞活化趋化因子(Eotaxin/CCL11)水平升高在SSc-ILD、pSS-ILD和RA-ILD三种疾病中与疾病进展显著相关(FDR<0.1);在pSS-ILD和RA-ILD中,KL-6水平的升高与FVC水平的降低显著相关(FDR<0.1),而在 SSc-ILD 中无显著相关性(FDR>0.1);CXCL10/IP-10 水平越高,三种疾病伴ILD患者的FVC水平越低(FDR<0.1);另外转化生长因子α(transforming growth factor-α,TGF-α)在 RA-ILD 中与 ILD 程度密切相关(FDR<0.1);血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-a)水平的升高在pSS-ILD中与ILD程度增加有显著相关性(FDR<0.1)。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC 曲线)用来进一步比较 KL-6、CXCL10/IP-10、Eotaxin/CCL11 三个因子在三种疾病中ILD从轻到重的相对敏感性和特异性,计算三个因子在三种疾病中生成曲线下的区域(areas under the curve,AUC)。KL-6 在 SSc-ILD 中的[AUC]值为0.82(敏感性为88.89%,特异性为78.95%),在pSS-ILD中的[AUC]值为0.81(敏感性为77.14%,特异性91.43%),在RA-ILD中的[AUC]值为0.90(敏感性为 81.82%,特异性为 90.91%);Eotaxin/CCL11 在 SSc-ILD 中的[AUC]值为0.68(敏感性为70.37%,特异性为63.16%),在pSS-ILD中的[AUC]值为0.69(敏感性为80.00%,特异性54.29%),在RA-ILD中的[AUC]值为0.65(敏感性为59.09%,特异性 72.73%);CXCL10/IP-10 在 SSc-ILD 中的[AUC]值为 0.62(敏感性为 36.84%,特异性为92.59%),在RA-ILD中的[AUC]值为0.61(敏感性为59.09%,特异性为68.18%),而在pSS-ILD中无意义。KL-6在三种疾病的肺间质病变的敏感性和特异性最高,Eotaxin/CCL11 比KL-6 低;对于 CXCL10/IP-10,在 SSc-ILD 和 RA-ILD 的比较中,在 SSc-ILD 的敏感性较高,特异性较低。结论:在SSc中,血清KL-6、CXCL10/IP-10和Eotaxin/CCL1 1水平的升高与ILD疾病严重程度相一致,三种因子水平越高,ILD疾病程度越严重。在pSS和RA中亦有相似结果。在SSc-ILD中CXCL10/IP-10水平的升高与用力肺活量水平下降相一致,KL-6水平的升高与用力肺活量下降无显著相关性。但在pSS-ILD和RA-ILD中,KL-6水平的升高与用力肺活量水平下降相一致。另外TGF-α水平升高与RA-ILD严重程度显著相关,VEGF和TNF-a水平升高与pSS-ILD严重程度显著相关。因此,KL-6、CXCL10/IP-10和Eotaxin/CCL11不仅可作为系统性硬化症肺间质病变早期诊断的有效血清生物标志物,也可作为干燥综合征和类风湿性关节炎肺间质病变的有效血清生物标志物。
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