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目的： 人类白细胞抗原-G（human leukocyte antigen-G，HLA-G）是第一个被发现的避免同种异体胎儿遭受母体免疫系统排斥的保护分子，属于非经典HLA Ib类分子。因其低多态性、组织分布特异及可产生4种膜结合型（mHLA-G）和3种可溶型（sHLA-G）异构体分子有别于经典HLA I类分子。HLA-G可以以游离形式存在于机体，也可表达于调节性细胞表面，或装载于外泌体（EXOs）等，最终以多种途径促使肿瘤细胞逃脱机体免疫监视。本文通过检测胃癌（GC）患者肿瘤组织、外周血树突状细胞（DC）亚群DC-10和血浆外泌体上HLA-G表达水平，并分析 HLA-G 表达与各临床参数的相关性，探究 HLA-G 分子在胃癌中的表达及临床意义，揭示肿瘤患者体内HLA-G以多种途径参与肿瘤的免疫逃逸，调节肿瘤微环境。 方法： 1. 胃癌患者肿瘤组织HLA-G分子表达的检测 收集 248 例胃癌患者癌组织及与其相对应的远端正常组织标本 160例，以蜕膜组织为对照组，应用免疫组织化学法（IHC）检测组织中HLA-G分子表达，并收集相关临床病理资料及预后情况。 2. 胃癌患者外周血DC-10上HLA-G分子表达的检测 收集124例胃癌患者及130例健康体检者新鲜外周血样本，采用流式细胞术（FCM）测定胃癌外周血中HLA-G+DC-10（％）及HLA-G+DC-10（MFI）表达。同时收集对应血浆标本，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测对应血浆中sHLA-G表达。 3. 胃癌患者血浆外泌体上HLA-G分子表达的检测 收集61例胃癌确诊患者治疗前及其相对应治疗后的外周血样本，同时选取47 例无胃病史的健康体检者作为正常对照组。应用外泌体提取试剂盒（exoEasy Maxi Kit）提取血浆中外泌体，采用FCM检测血浆外泌体及外泌体上HLA-G（HLA-Gev）的表达情况，同时采用ELISA检测血浆HLA-Gev的表达，Western Blot验证外泌体的存在。 结果： 1. 胃癌患者肿瘤组织HLA-G分子表达的检测 远端正常组织中未检测到 HLA-G分子表达，61.7％（153/248）胃癌组织中HLA-G分子表达阳性。统计结果分析，其表达水平与患者年龄、性别、分化程度、组织类型等临床参数均不相关，而与肿块位置（p=0.021）、肿瘤分期（p=0.021）相关。且高表达 HLA-G 患者的生存时间较低表达者明显缩短（mean：61.3个月vs88.6个月，95％CI：51.6-70.9 vs 75.8-101.4，p=0.002）。其生存时间还与分化程度（p=0.008）、肿瘤分期（p=0.000）高度相关。多变量分析显示，HLA-G 表达（HR：1.516，95％CI：1.030-2.232，p=0.035）可作为胃癌的独立预后因子。 2. 胃癌患者外周血DC-10上HLA-G分子表达的检测 结果显示，相比体检组（median：0.01％；range：0-0.33％），胃癌患者外周血单个核细胞（PBMC）中 HLA-G+CD83+CD14+CD16+DC-10（median：0.131％；range：0-1.17％）表达率显著增加（p＜0.01）。同时，HLA-G+DC-10（MFI）表达胃癌组（median：310.0；range：57.5-733.0）显著高于体检组（median：91.5；range：34.0-197.0，p＜0.01）。同样，血浆sHLA-G胃癌组（median：85.80U/ml；range：11.10-329.0）显著高于体检组（median：61.20U/ml；range：24.0-156.7，p＜0.01）。并且，HLA-G+DC-10（％）表达与肿瘤分期相关（p=0.021）。使用受试者工作特征曲线ROC来评估HLA-G+DC-10（％），HLA-G+DC-10（MFI），和血浆sHLA-G表达水平对胃癌的诊断价值。三者曲线下面积（AUC）分别为0.947（95％CI：0.917-0.978， p＜0.01），0.882（95％CI：0.835-0.929，p＜0.01），0.700（95％CI：0.631-0.768，p＜0.01）。 3. 胃癌患者血浆外泌体上HLA-G分子表达的检测 胃癌患者治疗前、治疗后血浆 HLA-Gev FCM 检测值均数分别为 62.13％、47.26％ ，差异有统计学意义（p=0.000），其中手术治疗前高于治疗后，且都高于正常对照组（（X） =38.03％）；治疗前后HLA-GevELISA检测值均数分别为83.97U/ml、69.11U/ ml，其手术治疗前血浆HLA-GevELISA检测值高于治疗后，差异无统计学意义（p=0.071），治疗前高于正常对照组（（X）=45.43U/ ml），差异有统计学意义（p=0.000）。Pearson相关性分析显示患者血浆 HLA-Gev FCM 检测值和血浆 HLA-Gev ELISA 检测值基本无相关性（R2=0.012，p=0.406）。Western Blot实验中外泌体特异性抗体CD81表达阳性，且FCM实验中外泌体特异性抗体CD63高表达，证实外泌体存在。ROC曲线显示血浆HLA-Gev FCM检测值和血浆HLA-Gev ELISA检测值两者曲线下面积分别为0.734（95％CI：0.622-0.847，p＜0.01），0.757（95％CI：0.659-0.855，p＜0.01）。 结论： 本研究通过检测HLA-G分子在外泌体、DC-10细胞和肿瘤组织中的表达，揭示HLA-G能以不同的途径参与胃癌的免疫逃逸，在胃癌的病程进展、疗效监测及预后评估等方面具有潜在的临床应用价值，为以HLA-G为靶点的肿瘤免疫治疗提供新思路。