“攻毒扶正法”治疗大鼠肝纤维化的实验研究

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[目的]:  采用乙肝系列中成药(乙肝清热解毒颗粒、乙肝养阴活血颗粒)探讨中医清热解毒法、养阴活血法单独使用及联合应用对大鼠免疫性肝纤维化模型的影响,为中医攻毒扶正法确立“毒痰瘀虚”的病机理论提供实验依据。  [方法]:  用猪血清腹腔注射诱导免疫性肝纤维化模型,成模后再用乙肝系列冲剂进行干预治疗,并与秋水仙碱组、复方鳖甲软肝片组进行对照,设置正常组、模型组、秋水仙碱组、复方鳖甲软肝片组、清热解毒组、养阴活血组及合方组共7组,观察肝脏组织HE及MASSON染色的病理改变,检测血清肝功能、肝纤维化四项指标、肿瘤坏死因子(TNF-a)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-6(IL-6);测定肝组织转化生长因子(TGF-β)、血小板衍生生长因子(PDGF)、金属基质蛋白酶-1(MMP-1)、α-SMA、TGF-β1、CTGF、Smad3、Smad7含量。  [结果]:  1.各药物组对于TBIL、TP、ALT、AST水平均有降低作用,其中清热解毒组,养阴活血组,合方组治疗效果明显(P<0.05,P<0.01),养阴活血组效果更显著(P<0.05,P<0.01);秋水仙碱组与复方鳖甲软肝片组虽有调节趋势,但其差异无统计学意义(P>0.05)。  2.与模型组比较,各治疗组HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ水平均有不同程度的改善,差异有统计学(P<0.01,P<0.05),其中合方组的治疗效果更为显著(P<0.01,P<0.05)。  3.与模型组比较,各治疗组对TGF-β、PDGF、MMP-1治疗有不同程度的改善,差异有统计学(P<0.01,P<0.05),秋水仙碱组与复方鳖甲软肝片组治疗差异有统计学(P<0.01,P<0.05)。  4.与模型组比较,除复方鳖甲软肝片组无统计学差异(P>0.05),余治疗组对α-SMA有明显治疗效果,差异有统计学(P<0.01),尤其是合方组更为显著(P<0.01)。  5.与模型组比较,各治疗组对TGF-β1、CTGF、Smad3、Smad7治疗有不同程度的改善,合方组效果显著。  6.肝脏镜下病理观察,HE染色显示:模型组大鼠肝小叶结构破坏,胶原纤维增生明显,汇管区扩大并伴有炎性细胞浸润,胶原纤维间隔形成,出现大小不等的假小叶;MASSON染色结果:模型组大鼠肝脏胶原纤维明显增多,纤维间隔形成,有明显的假小叶形成。各治疗组有不同程度的治疗效果(P<0.01,P<0.05),合方组最明显(P<0.01)。  [结论]:  HF大鼠存在明显的肝纤维化损伤情况,攻毒扶正方能不同程度地抑制HF大鼠HSC增殖活化,促进HSC凋亡;改善ECM代谢紊乱,抑制ECM生成积聚,促进ECM降解;抑制CK的过度表达,对HF具有确切的治疗作用,从一定程度上说明“毒”“痰”“瘀”“虚”是HF的基本病机要素,可以为攻毒扶正法指导HF的治疗提供一定的实验证据。
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