目的:　　 通过检测mTOR(mammalian target of rapamycin)相关信号分子在鼻咽癌细胞中的表达，探讨mTOR信号通路在鼻咽癌细胞中是否激活，进一步用mTOR抑制剂雷帕霉素探测其对鼻咽癌原代细胞中蛋白表达及细胞增殖的调控作用。　　 方法:　　 1.利用原代培养的人类鼻咽癌细胞，采用Western blot检测人类鼻咽癌细胞中mTOR信号通路中四种蛋白S6、mTOR、pS6和pmTOR的活化情况。其中pS6和pmTOR是mTOR信号的活化形式。　　 2.免疫荧光细胞化学检测mTOR和pmTOR在鼻咽癌细胞中的表达部位。　　 3.采用Western blot方法检测不同浓度雷帕霉素作用24小时后细胞中S6、pS6、mTOR、pmTOR蛋白的表达量。　　 4.CCK8检测雷帕霉素或对照组作用24小时后细胞的凋亡情况。　　 5.统计学处理:不同浓度雷帕霉素对细胞生长的抑制采用One-way ANOVA方差分析，多重比较采用LSD法。　　 结果:　　 1.Western blot检测结果显示S6、pS6、mTOR、pmTOR四种蛋白在原代培养的人类鼻咽癌细胞中呈阳性表达。免疫荧光进一步证实mTOR和pmTOR两种蛋白主要表达于鼻咽癌细胞浆中。　　 2.Western blot检测结果显示，当雷帕霉素浓度分别为O，30，50，100 nmol/L时，随着药物浓度的增加，mTOR和pmTOR两种蛋白的表达量逐渐下降;同样，当雷帕霉素浓度为0，20，50，100 nmol/L时，S6和pS6两种蛋白的表达量随着药物浓度增加逐渐下降。　　 3.当雷帕霉素浓度分别为0、5、10、30、40、50、100nmol/L时，随着药物浓度的加大，相应的细胞存活率逐渐下降。但当雷帕霉素浓度超过100 nmol/L时，随着药物浓度增加，其对鼻咽癌细胞增殖抑制的影响没有明显变化。通过凋亡实验，我们可以明显地看出雷帕霉素浓度分别为0 nmol/L、1000 nmol/L时，鼻咽癌细胞的存活率存在较大差异。　　 结论:　　 1.Western blot检测结果显示mTOR信号通路中S6、pS6、mTOR、pmTOR四种蛋白在鼻咽癌中均呈阳性表达，从而说明mTOR信号在人类原发鼻咽癌中被激活。免疫荧光进一步显示mTOR和pmTOR主要在鼻咽癌细胞浆中表达。　　 2.Western blot检测结果显示雷帕霉素在体外能够一定程度下调鼻咽癌细胞中S6、pS6、mTOR、pmTOR蛋白的表达，而且该作用在一定范围内呈现剂量依赖性。　　 3.CCK8和药物凋亡实验检测不同浓度雷帕霉素处理24h后细胞的存活情况，结果显示在一定范围内，随着雷帕霉素浓度的增加，其对鼻咽癌细胞增殖抑制越明显，但当雷帕霉素浓度超过100 nmol/L时，随着药物浓度增加，其对鼻咽癌细胞增殖抑制的影响没有明显变化。凋亡实验显示药物浓度为1000 nmol/L时，细胞的存活率明显低于未加药组。　　 4.由此推断，mTOR信号通路在人类鼻咽癌细胞中激活，而且对其增殖起着至关重要的作用。雷帕霉素不仅能通过下调mTOR信号通路相关蛋白的表达抑制mTOR信号通路的活性，而且能有效抑制鼻咽癌细胞增殖。因此，使用针对mTOR信号的靶向抑制剂清除鼻咽癌细胞，不仅提供了一条新途径，而且可能成为一个革新性的治疗策略。