“双固一通”针法对帕金森病模型大鼠黑质多巴胺能神经元保护作用研究

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目的 探讨“双固一通”针法对帕金森病模型大鼠中脑黑质多巴胺能神经元的保护作用。 方法 以6-羟基多巴胺右侧纹状体微量注射法制备偏侧帕金森病大鼠旋转模型,采用“双固一通”针法进行治疗,以单纯针刺风府、太冲作为对照,同时设立正常对照组、假手术组、模型组、风府太冲组、双固一通组。(1)采用组织化学方法观察各组黑质及纹状体的形态学变化,以免疫组织化学方法和流式细胞术检测各组黑质、纹状体酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞和纤维的形态及数量;(2)采用流式细胞术检测各组黑质细胞凋亡比例;(3)采用免疫组织化学方法检测各组黑质、纹状体胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)阳性细胞数量,以免疫印迹法检测各组黑质GDNF功能性受体Ret含量;(4)采用免疫组织化学方法观察各组黑质、纹状体细胞增殖情况及神经干细胞(NSC)数量变化,以免疫组织化学双标记法观测各组NSC转化为神经元的数量。 结果 (1)模型组损毁侧黑质致密部神经元总数、TH阳性神经元数量及纹状体TH阳性神经纤维数量显著低于正常组和假手术组(P<0.01),两针刺组与模型组比较各相应指标数值均显著增加(P<0.01),两针刺组之间无显著性差异(P>0.05);(2)两针刺组损毁侧黑质细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.01),但仍较正常组和假手术组显著增高(P<0.01),两针刺组之间无显著性差异(P>0.05);(3)两针刺组损毁侧黑质、纹状体GDNF阳性细胞数量比其它三组显著增加(P<0.01),两针刺组之间比较双固一通组显著高于风府太冲组(P<0.05);两针刺组损毁侧黑质Ret含量显著高于其它三组(P<0.01),两针刺组之间无显著性差异(P>0.05);(4)两针刺组损毁侧黑质、纹状体增殖细胞显著增多(P<0.01),但只有双固一通组损毁侧黑质、纹状体神经干细胞及增殖的神经元数量显著增加(P<0.01)。 结论 两种针刺方法对PD模型大鼠黑质多巴胺能神经元均具有显著的保护作用,但双固一通针法显示出更强的保护效应。
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