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杆状病毒基因在宿主细胞中的表达具有时相性，在感染晚期可以观察到宿主细胞的细胞质和细胞核中均有纤维结构的存在，这些纤维结构的形成与P10蛋白有关。杆状病毒的早期研究发现p10基因并不是病毒复制过程中的必需基因，但在病毒粒子包涵体的形成过程中，P10蛋白可能与多角体蛋白相互作用，对稳定包涵体的多角体外壳起至关重要的作用。本文以大肠杆菌表达家蚕核型多角体病毒P10蛋白，探索原核表达的P10蛋白的一些理化性质和结晶条件。首先构建pET-32a-p10重组表达载体并在大肠杆菌中表达。在NaCl浓度超过100mM的溶液中，表达的His6-P10重组可溶性蛋白经4℃静置8-10h发生自然沉降，而在不含NaCl的溶液中又会恢复到溶解状态，经实验证明，这两种状态可逆。WesternBlotting和质谱进一步鉴定，证明发生自然沉降的物质是重组蛋白His6-P10，通过调节溶液中NaCl的浓度获得较纯的重组蛋白。对自然沉降的重组蛋白进行非变性凝胶电泳分析，发现重组蛋白以聚体的形式存在于溶液中。为了探索P10蛋白的存在状态，构建pGEX-6P-1-p10载体，利用prescission protease对重组蛋白进行酶切，得到P10蛋白。经非变性凝胶电泳分析发现P10蛋白也是以聚体的形式存在于溶液中。P10蛋白在被感染的宿主细胞中会形成纤维结构，而在原核表达状态下会以聚体的形式存在，说明P10蛋白分子之间可能存在某种相互作用，使其具有这种特性。为了进一步推进家蚕核型多角体病毒P10蛋白的研究，首先要从P10蛋白的空间结构来解释该蛋白的上述特性，因此初步筛选了His6-P10重组蛋白和P10蛋白的结晶条件。多角体病毒形成的包涵体主要是由多角体蛋白和P10蛋白构成，并且形成了多面体结构。为了研究这两种蛋白在组装过程中的相互作用，对这两种蛋白进行融合表达、结晶和空间结构研究，构建pET-28a-polh-p10重组表达载体，利用多角体蛋白不同pH条件下的溶解特性分离表达的重组蛋白，并以凝胶过滤层析纯化，将纯化产物进行结晶条件的初筛。由于本实验室得到的MnSOD蛋白易于结晶，因此希望能将P10蛋白与其融合表达，在MnSOD结晶堆积的同时，牵引P10蛋白一起结晶，进而解析P10的空间结构。因此，我们构建了pET-28a-MnSOD-p10，得到的重组蛋白经过高温处理、镍离子金属螯合亲和层析纯化，并将纯化产物进行结晶条件的初筛。最后得到MnSOD-P10融合蛋白的结晶条件，空间结构解析发现，MnSOD-P10融合蛋白C端P10部分信号微弱，可能发生降解，因此P10蛋白的结晶条件仍需进一步改进和完善。本文在P10蛋白纯化研究上提出了一些见解，为P10蛋白今后的纯化提供了简便高效的方法，而且在P10蛋白空间结构的研究上也取得了一定的进展。本课题为今后进一步研究P10蛋白的性质和空间结构提供了基础资料，也为研究家蚕核型多角体病毒的侵染机制奠定了基础。