黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆相关基因信号通路及Fas/FasL影响的研究

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目标 观察血管性痴呆大鼠神经细胞 Fas/FasL 凋亡通路、NO-cGMP 信号通路、cAMP-PKA-cAMP反应元件结合蛋白通路的变化及学习记忆相关基因的表达,以及中药黄蒲通窍胶囊干预后上述通路的变化及对学习记忆相关基因的影响,探讨黄蒲通窍胶囊改善血管性痴呆的内在机制。 方法 制作线栓法大脑中动脉栓塞所致的血管性痴呆大鼠模型,随机分成 3 组,每组 15 只,即模型组、中药组(黄蒲通窍胶囊组)、阳性对照组(都可喜组),并设空白组和假手术组。等体积灌胃给药,免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织 Fas/FasL、NF-κB、PKA、CREB、c-fos、c-jun 蛋白表达,比色法测定 NO 含量和 NOS 活性,放射免疫法测定 cAMP、cGMP 含量。数据处理及统计采用 SPSS 11.0 软件。 结果 1.黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠神经细胞 Fas/FasL、NF-κB 表达的影响 4W后,中药组Fas、FasL的阳性细胞数明显降低,中药组NF-κB明显降低,与模型组相比均有显著性差异(P<0.01); 2.黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠脑组织 cAMP、PKA、CREB、c-fos 和 c-jun 的影响 4W 后中药组脑组织中 cAMP 的含量明显增高,神经细胞 CREB、PKA 的表达明显增高,中药组神经细胞 c -fos 和 c-jun 表达明显增强,与模型组相比均有显著性差异(P<0.01); 3.黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆影响的 NO-cGMP 信号的机制 4W后中药组大鼠NO含量、NOS 活性和cGMP水平显著降低,与模型组相比有显著性差异(P<0.01); 结论 黄蒲通窍胶囊可能通过下调Fas蛋白的表达,抑制由Fas信号路径诱导神经细胞凋亡的发生;可能通过下调NF-κB的表达,产生脑保护和抑制神经细胞凋亡的作用;可能通过上调脑组织cAMP含量、上调PKA和CREB的表达,激活cAMP-PKA-CREB通路,启动和调控某些与学习记忆功能相关基因如c-fos和c-jun的表达;可能通过减少NO路径诱导的细胞凋亡发生,降低NO的神经毒性,保护脑细胞,并可能通过胶囊可能通过减少过高的NO而促进VaD大鼠学习记忆能力的改善。这些可能是黄蒲通窍胶囊改善血管性痴呆的重要机制。
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