【摘 要】
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内蒙古阿尔巴斯白绒山羊是我国的优良山羊品种,所产的高品质绒毛常被用于生产各种纺织品。绒毛的品质与绒山羊皮肤组织毛囊的生长发育相关,毛囊的周期性生长过程受多种基因和蛋白的调控。研究表明波形蛋白在绒山羊次级毛囊细胞周期发育中呈显著差异性表达,但其作用机制尚不清晰。为了进一步明确波形蛋白的作用机制,本试验应用PCR技术克隆波形蛋白基因启动子序列,并进行生物信息学分析,将其与pEGFP-N1荧光载体连接转
【基金项目】
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国家地区自然科学基金(No.31860626); 内蒙古自治区自然科学基金项目(No.2018MS03015); 内蒙古教育厅自然科学基金项目(No.NJZY17059);
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内蒙古阿尔巴斯白绒山羊是我国的优良山羊品种,所产的高品质绒毛常被用于生产各种纺织品。绒毛的品质与绒山羊皮肤组织毛囊的生长发育相关,毛囊的周期性生长过程受多种基因和蛋白的调控。研究表明波形蛋白在绒山羊次级毛囊细胞周期发育中呈显著差异性表达,但其作用机制尚不清晰。为了进一步明确波形蛋白的作用机制,本试验应用PCR技术克隆波形蛋白基因启动子序列,并进行生物信息学分析,将其与pEGFP-N1荧光载体连接转染成纤维细胞,利用免疫荧光技术检测其活性;利用酵母杂交技术构建波形蛋白转录因子的cDNA文库和互作蛋白鉴定。结果表明:(1)成功克隆Vimentin基因启动子序列,检测出2198 bp长度的启动子具有转录活性。(2)初步建立Vimentin转录因子的cDNA文库。(3)成功克隆Vimentin与ACTB基因,构建出酵母表达载体。(4)应用酵母双杂交试验初步证明了Vimentin和ACTB之间存在相互作用关系。
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