【摘 要】
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目的本研究旨在揭示BP-1-102是否通过巨噬细胞来调节垂体腺瘤进展,并为BP-1-102作为抗肿瘤药提供了新的实验依据,同时丰富了其药物机理。方法1.选择Raw264.7细胞,分为:（1）M（?）组、DMSO组、M1组、M1+BP(4×10-6mol·L-1)组、M1+BP(6×10-6mol·L-1)组、M1+BP(8×10-6mol·L-1)组;（2）M（?）组、DMSO组、M2组、M2+B
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目的本研究旨在揭示BP-1-102是否通过巨噬细胞来调节垂体腺瘤进展,并为BP-1-102作为抗肿瘤药提供了新的实验依据,同时丰富了其药物机理。方法1.选择Raw264.7细胞,分为:（1）M（?）组、DMSO组、M1组、M1+BP(4×10-6mol·L-1)组、M1+BP(6×10-6mol·L-1)组、M1+BP(8×10-6mol·L-1)组;（2）M（?）组、DMSO组、M2组、M2+BP(4×10-6mol·L-1)组、M2+BP(6×10-6mol·L-1)组、M2+BP(8×10-6mol·L-1)组。用BP-1-102处理Raw264.7细胞24 h,然后分别将其诱导为M1型（F4/80+CD86）和M2型（F4/80+CD206）巨噬细胞。运用流式细胞技术,检测各组细胞F4/80+CD86或F4/80+CD206表达水平;用ELISA和QPCR方法,检测各组细胞IL-10、VEGF-A和TGF-β1表达水平。2.选择AtT-20细胞和Raw264.7细胞,分为PA组、PA+M（?）组、PA+M1组、PA+M2组。将巨噬细胞与AtT-20细胞共培养,用CCK-8检测AtT-20细胞侵袭和增殖能力,用流式细胞技术检测AtT-20细胞周期和凋亡水平。3.选择AtT-20细胞和Raw264.7细胞,分为PA+M1组、PA+(M1+BP 8×10-6mol·L-1)组、PA+M2组、PA+(M2+BP 8×10-6mol·L-1)组。用BP-1-102(8×10-6mol·L-1)干预巨噬细胞,并与AtT-20细胞共培养,用CCK-8检测AtT-20细胞侵袭和增殖能力,用流式细胞技术检测AtT-20细胞周期和凋亡水平。结果1.BP-1-102对巨噬细胞极性和细胞因子表达水平的影响（1）巨噬细胞极性:（1）M（?）组与DMSO组比,结果差异不明显。（2）M1组与M（?）组比,F4/80+CD86表达增高;经BP-1-102处理的M1型巨噬细胞:随着BP-1-102浓度增加,F4/80+CD86表达逐步下降。（3）M2组与M（?）组比,F4/80+CD206表达明显增高;经BP-1-102处理的M2型巨噬细胞:随着BP-1-102浓度增加,F4/80+CD206表达逐步下降。（4）与F4/80+CD86比较,随着BP-1-102浓度增加,F4/80+CD206受到的抑制作用增强。（2）细胞因子表达水平:（1）DMSO组与M（?）组比,IL-10、VEGF-A和TGF-β1表达无显著差异。（2）M1组与M（?）组比,IL-10和TGF-β1表达减少,VEGF-A表达增强;经BP-1-102处理的M1型巨噬细胞,随着BP-1-102的增加,IL-10和TGF-β1表达逐步提高,VEGF-A表达逐步下降。（3）M2组与M（?）组比,IL-10、VEGF-A和TGF-β1表达增强;经BP-1-102处理的M2型巨噬细胞,随着BP-1-102浓度的增加,IL-10、VEGF-A和TGF-β1表达逐步下降。2.巨噬细胞对垂体腺瘤的作用与PA组比,PA+M（?）组:AtT-20细胞的侵袭和增殖能力、细胞周期及凋亡水平无明显差异;PA+M1组:AtT-20细胞侵袭和增殖能力减弱,G0/G1期细胞数占比升高,凋亡程度提高;PA+M2组:AtT-20细胞侵袭和增殖能力提高,G0/G1期细胞数占比降低,凋亡程度下降。3.经BP-1-102干预的巨噬细胞对垂体腺瘤的作用与PA+M1组比,PA+(M1+BP 8×10-6mol·L-1)组:AtT-20细胞的增殖能力无明显差异,细胞的侵袭能力提高,S期+G2/M期细胞数量占比升高,凋亡程度下降。与PA+M2组比,PA+(M2+BP 8×10-6mol·L-1)组:AtT-20细胞的侵袭、增殖能力降低,S期+G2/M期细胞数量占比下降,凋亡程度升高。结论BP-1-102通过调节巨噬细胞极性和细胞因子表达,进而调节垂体腺瘤细胞的侵袭、增殖、周期和凋亡。
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