气阴两虚2型糖尿病大鼠氨基酸代谢谱的变化和蛋白干预的影响

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目的:研究植物蛋白和动物蛋白对气阴两虚2型糖尿病大鼠氨基酸代谢谱的影响。方法:将110只雄性SD大鼠随机分为空白组(10只),糖尿病模型组(20只),病症结合组(80只),正常组大鼠给予普通饲料,其余给予高糖高脂饲料全程喂养,期间病症结合组灌服青皮附子(15.75 g/kg)每日一次,5w后,腹腔注射小剂量STZ(40 mg/kg)建立实验性糖尿病大鼠模型(正常组除外),将病症结合成模的大鼠按照血糖随机分为气阴两虚糖尿病模型组(附子青皮,15.75 g/kg),大豆蛋白组(大豆蛋白,0.5g/kg),牛奶蛋白组(牛奶蛋白,0.5 g/kg),黄连素组(黄连素,0.1 g/kg),连续灌胃给药4周。蛋白干预4周后,腹主动脉采血分离其血清,1.运用BS-120全自动生化仪检测大生化指标。2.运用1H-NMR寻求对体内特征性代谢物。3.运用AQC柱前衍生高效液相色谱法,利用荧光检测器对血清中游离氨基酸进行分析。结果:蛋白干预4周后,大豆蛋白、牛奶蛋白与黄连素对2型糖尿病大鼠体重和血糖无明显影响。1.与气阴两虚糖尿病组比较,大豆蛋白组总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)、血肌酐(Crea)、尿蛋白(Pro)明显升高(P<0.05),尿素氮/肌酐(BUN/CREA)、尿素(Urea)显著降低(P<0.05),牛奶蛋白组BUN/CREA显著降低(P<0.05)。2.与气阴两虚DM模型组比较,大豆蛋白组乳酸、肌酸明显降低(VIP>3),α-葡萄糖明显增加且均有显著性差异(VIP>3),牛奶蛋白组乳酸明显降低(VIP>3),α-葡萄糖明显增加且均有显著性差异(VIP>3),黄连素组β-羟异丁酸、乳酸、肌酸明显降低(VIP>3),岩藻糖、α-葡萄糖明显增加且均有显著性差异(VIP>3)。3与气阴两虚糖尿病模型组比较,大豆蛋白组明显增加丙氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、精氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸+亮氨酸、苏氨酸(r>0,且VIP>1),牛奶蛋白组明显增加丙氨酸、酪氨酸、脯氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸+亮氨酸、丝氨酸、甘氨酸(r>0,且VIP>1),黄连素组明显增加丙氨酸、异亮氨酸+亮氨酸、丝氨酸、牛磺酸、甘氨酸、蛋氨酸、精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、谷氨酸(r>0,且VIP>1)。结论:蛋白灌胃对气阴两虚2型糖尿病SD大鼠氨基酸代谢能产生了一定的影响,对肝、肾功能具有一定的保护作用。通过代谢组学技术找到标志性差异化合物,从而为2型糖尿病早期预警和气阴虚证侯提供实验依据。
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