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目的:研究益气养阴解毒方制备的含药血清对白血病K562/A02细胞多药耐药的逆转作用,探讨益气养阴解毒方含药血清逆转白血病K562/A02细胞多药耐药的机制,为益气养阴解毒方逆转白血病K562/A02细胞多药耐药提供理论和实验依据。
方法:采用噻唑蓝(MTT)法测定益气养阴解毒方含药血清对K562和K562/A02细胞的细胞毒作用;无细胞毒剂量的含药血清与维拉帕米对比研究K562/A02细胞耐药性的逆转作用;流式细胞仪测定不同药物作用前后靶细胞内阿霉素浓度的蓄积,并测定K562/A02细胞上Pgp及Bcl-2表达情况及K562、K562/A02细胞的凋亡情况。
结果:①益气养阴解毒方含药血清在无细胞毒剂量时作用于白血病K562/A02细胞,能够部分逆转K562/A02细胞的耐药性,降低阿霉素对K562/A02细胞的IC50值,提高靶细胞对阿霉素的敏感性;
②益气养阴解毒含药血清作用于K562/A02细胞后,细胞内阿霉素的平均荧光强度均有不同程度的增加,因此增加细胞内阿霉素浓度是益气养阴解毒方含药血清逆转K562/A02细胞耐药的机制之一;
③益气养阴解毒含药血清可明显增加K562细胞和K562/A02细胞的凋亡率,并可以下调K562/A02细胞内凋亡基因Bcl-2的表达,因此促进靶细胞凋亡也是益气养阴解毒含药血清逆转K562/A02细胞耐药的机制之一;
④益气养阴解毒方含药血清并不能降低K562/A02细胞膜P糖蛋白的表达,因其与化疗药阿霉素联用时K562/A02细胞膜上P糖蛋白的表达并无降低,故益气养阴解毒方含药血清逆转白血病K562/A02细胞多药耐药作用机制与抑制P糖蛋白表达无关。
结论:①益气养阴解毒方含药血清可以部分逆转白血病K562/A02细胞的多药耐药。
②益气养阴解毒方含药血清逆转白血病K562/A02细胞多药耐药的机制与提高白血病K562/A02细胞内化疗药物浓度聚集、促进K562/A02细胞凋亡、下调凋亡基因Bcl-2的表达有关;与干扰P糖蛋白的表达无关。