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目的：我们前期工作发现 miR-486-5p 是肺癌中最显著低表达的miRNAs之一，其在痰液和外周血中表达有助于肺癌的早期诊断，通过调控靶基因ARHGAP5、Pim-1表达参与肺癌的生长、侵袭与转移等过程。鉴于miRNA对基因表达调控的复杂性，本研究拟在前期工作的基础上，进一步通过iTRAQ(IsobaricTag forRelative andAbsoluteQuantitation）蛋白质定量技术对miR-486-5p 调控的靶基因进行筛选和评价，以期更加全面地揭示其在肺癌中的作用机制。 方法： 体外培养H1299和H157细胞，给予miR-486质粒或空载体转染筛选获得稳定细胞株；采用Taqman microRNA assay方法验证miR-486-5p的表达；提取细胞总蛋白采用iTRAQ定量蛋白质组学技术检测细胞中蛋白质表达情况，并对两组细胞中差异蛋白进行分析。应用SPSS Statistics17.0软件，计量资料以均数±标准差（(x)±?s )表示，数据采用t检验，P<0.05认为差异有统计学意义。 结果： 1. 利用iTRAQ技术检测过表达miR-486-5p对H1299细胞蛋白表达谱的变化： 与对照组相比，H1299-miR-486-5p细胞中25个蛋白表达上调，27个蛋白表达显著下调。表达上调的蛋白主要与氨酰基-tRNA生物合成通路相关；表达下调蛋白主要与核糖体通路相关。差异蛋白间的相互关系主要包括：SLIT1（下调）-POTEJ（上调）-PDP2（上调）；AP4S1（上调）-RAB6B （下调）-TB22B（上调）；DD19B（上调）-XPO6（下调）。 2. 利用iTRAQ技术检测过表达miR-486-5p对H157细胞蛋白表达谱的变化： 与对照组相比，H157-miR-486-5p 细胞中表达上调的蛋白有 70 个，而表达下调的蛋白有135个。表达上调蛋白参与的相关信号通路包括核糖体生物合成、剪接体、RNA 转运等。而表达下调蛋白与内质网蛋白质加工通路显著相关。差异蛋白间的相互作用包括：SLIT1（下调）- EPHA2 （下调）-RHOA（下调）-DOCK1（上调）；TYY1（下调）-BIRC5（上调）-CTCF（下调）-GRB10（上调）等等。 3. 两种过表达miR-486-5p细胞中共同调控蛋白的筛选 对两种细胞的差异蛋白结果取交集后发现，仅 SLIT1 基因在两组细胞中表达均下调。 结论： 1. 筛选获得了稳定过表达miR-486-5p的H1299和H157细胞。 2. H1299-miR-486-5p 细胞中 25 个表达上调的蛋白主要与氨酰基-tRNA生物合成通路相关；27个表达下调蛋白主要与核糖体通路相关。 3. H157-miR-486-5p 细胞中 70 个表达上调蛋白参与的相关信号通路包括核糖体生物合成、剪接体和RNA转运等。135个表达下调蛋白主要参与内质网蛋白质加工等相关通路。 4. SLIT1 基因在两种过表达 miR-486-5p 的细胞中均表达下调，提示SLIT1基因可能是miR-486-5p所调控的靶基因之一。