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目的: 喉癌是耳鼻喉最常见的恶性肿瘤之一，癌细胞的侵袭和转移影响着喉癌患者的预后。部分病例虽然临床上未发现肿大淋巴结，但实际上已存在淋巴结的微灶转移或有远处转移的危险性，所以肿瘤转移标志物的研究为确诊微灶转移和远处转移提供了可能。钙粘蛋白(Cadherins) 和整合素（Integrins, IF）就是两类与癌转移相关的粘附分子。 E- Cadherin 蛋白主要介导细胞与细胞间的粘附，它的表达与癌细胞的侵袭及转移呈负相关。整合素α3β1 属于β1组整合素，在上皮组织中主要参与细胞与基底膜的粘附，有研究已证实，它的异常表达与癌肿的形成、复发和转移有关。 本研究采用流式细胞术（FCM）检测了 E-Cadherin 蛋白和整合素α3、β1 亚单位在喉癌中的表达，旨在探讨此三种蛋白在喉癌的发生、发展及转移过程中的作用及相关性，寻找可能预测喉癌发生、转移及预后的肿瘤标志物，对临床治疗提供一定的理论指导。 方法 1. 材料 采用 2002 年 11 月～2003 年 11 月，于河北医科大学附属第四医院耳鼻喉-头颈外科住院手术治疗的 50 例原发喉癌患者新鲜手术切除癌组织及50例相应癌旁组织（距肿瘤边缘>0.5cm），和非喉部疾病患者的正常喉粘膜组织 18例。所有组织取材后即用 70%酒精固定，4℃冷藏保存。 1<WP=4>中 文 摘 要 2. FCM 方法 一抗：羊抗人 IgG 型 Integrinα3 抗体(I-19)，鼠抗人 IgG2α型单克隆 Integrinβ1 抗体(K20)， 鼠抗人 IgG1 型单克隆 E-cadherin 抗体(G-10)。二抗: 羊抗鼠FITC-IgG 抗体。单细胞悬液制备，细胞免疫荧光染色后，上机检测。 3. 结果判定 整合素α3、β1 亚单位和 E-Cadherin 蛋白表达的定量分析：按照 Morkve 等提出的荧光指数（FI）表示三种蛋白表达的相对含量。公式如下： 实验样品的平均荧光强度-对照样品的平均荧光强度 FI＝ 正常组织样品的平均荧光强度 阳性结果的判定： 肿瘤细胞的FI 值大于正常组织细胞的 x ±2S 为阳性，反之为阴性(E-Cadherin FI＞0.88，整合 FI素α3 FI＞1.10，整合素β1 FI＞1.12)。 4. 统计方法 所有数据经 Excell 数据库整理，应用SPSS 10.0 for windows 统计软件包进行方差分析，LSD 检验，t、t＇检验， 检验，Fisher 精确计算和多元回归分析。 x2以 P ≤0.05 为差异在统计学上有显著性意义，P ≤0.01 为差异在统计学上有非常显著性意义。 结果 1. E-Cadherin 蛋白的表达 E-Cadherin 蛋白在喉癌组织中的表达量（FI=0.88）明显低于癌旁组织（0.95）（P＝0.005）和正常喉粘膜组织（1.00）（P＝0.000），喉癌组织中的阳性表达率（56％）也低于癌旁组织（76％）（ ＝4.456，P=0.035）和正常喉粘膜组织（88.9 x 2％）（ ＝6.269，P=0.012）；癌旁组织和正常喉粘膜组织间 x2的表达差异无统计学意义。 2<WP=5>中 文 摘 要 喉癌组织中，E-Cadherin 蛋白在淋巴结转移组（N＋）的表达量（0.82）和阳性表达率（0）与无淋巴结转移组（N0）（0.90，73.7％）相比，有非常显著统计学差异（P＝0.000）（ ＝35.380，P=0.000），N＋组的表达量和阳性表达率均明x 2显低于 N0组；在临床Ⅰ、Ⅱ期组的表达量（0.90）和阳性表达率（73.3％）与临床Ⅲ、Ⅳ期组 (0.85，30％）相比，有非常显著统计学差异（P＝0.009）（ ＝9.145，P=0.002），临 x 2床Ⅲ、Ⅳ期组的表达量及阳性表达率明显低于临床Ⅰ、Ⅱ期组；E-Cadherin 蛋白在不同临床分型、性别、年龄中的表达量和阳性表达率均无统计学差异。 2. 整合素α3 亚单位的表达 整合素α3亚单位在喉癌组织中的表达量（FI=1.24）及阳性表达率（84％）明显高于癌旁组织（1.09，24％）和正常喉粘膜组织（1.00，0），（P＝0.000）（ ＝36.232，P＝0.000） x 2（P＝0.000）（ ＝39.549，P＝0.000）；癌旁组织和正常喉 x2粘膜组织间的表达差异无统计学意义。 喉癌组织中，α3 在 N＋组的表达量（1.44）和阳性表达率（100％）与 N0 组（1.17，78.9％）相比，定量表达有统计学差异（P＝0.045），N＋组中表达量高于 N0组，但定性表达两组间无明显差异。α3 在不同临床分期、临床分型、性别、年龄中的表达量和阳性表达率均无统计学差异。 3. 整合素β1 亚单位的表达 整合素β1亚单位在喉癌组织中的表达量（FI=1.20）和阳性表达率（96％）明显高于癌旁组织（1.05，22％）和正常喉粘膜组织（1.00，0）。（P=0.000）（ ＝56.594，P＝0.000） x2（P＝0.000）（ ＝58.752，P＝0.000）；癌旁组织和正常喉 x2 3<WP=6>中 文 摘 要粘膜组织间的表达差异无统计学意义。 喉癌组织中，β1 在 N＋组中的表达量（1.27）和阳性表达率（100％）与 N0 组（1.18，94.7％）相比，定量表达有统计学差异（P＝0.029），N＋组中表达?