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目的:肾上腺髓质素(Adrenomedulin,ADM)是一种有52个氨基酸残基组成的活性肽,其除了具有扩张血管,增加管壁通透性等功能外,还有报道肾上腺髓质素在对抗炎症反应方面还具有抑制致炎因子释放,稳定血管内皮细胞的作用。因而本实验欲观察肾上腺髓质素对小肠微血管内皮的保护作用是否与降低血管细胞间黏附分子(Vascular Cell Adhesion Molecule-1,VCAM-1)的表达从而导致炎症因子的释放减少有关,并以该途径来减缓或抑制脓毒症的发生发展。方法:1.大鼠小肠微血管内皮细胞(RIMMVECs)在体外分离运用局部消化方法和差速黏附方法进行细胞的纯化处理及培养,并根据RIMMVECs描绘其生长曲线及用CD34标记后免疫荧光鉴定RIMMVECs,然后分别用假手术组血清,脓毒症组血清和ADM+脓毒症组血清刺激24h后进行检测;2.用RT-PCR法检测各组血清刺激后RIMMVECs内VCAM-mRNA的转录水平,观察ADM在转录水平对VCAM-1的影响;3.流式细胞术检测各组血清刺激后RIMMVECs膜表面VCAM-1的表达,观察ADM在分子表达水平对VCAM-1的影响。4.用ELISA法检测各组血清刺激RIMMVECs培养后上清液中可溶性VCAM-1的含量,观察ADM的输入是否能减少RIMMVECs内VCAM-1的释放。结果:1:局部消化方法和差速黏附方法得到纯化的RIMMVECs,纯度在90%以上,并用CD34标记后免疫荧光进行了鉴定;2:酶联免疫吸附试验结果显示ADM干预组血清刺激细胞24h后细胞培养上清液中VCAM-1的含量(0.21±0.06ng/ml)明显较脓毒症组(0.63±0.13ng/ml)的含量低,而ADM干预组与正常组(0.09±0.02 ng/ml)无显著统计学差异(P>0.05);3:RT-PCR结果显示ADM干预组刺激的细胞内VCAM-1mRNA的水平低于脓毒症组,有显著的统计学差异(P<0.05),而与正常组比较无显著的统计学差异(P>0.05);4:FITC标记抗大鼠VCAM-1单克隆抗体,流式细胞仪检测显示ADM干预组刺激的RIMMVECs膜表面VCAM-1表达(124.63±54.32)也低于脓毒症组(202.75±57.21),而与正常组(112.95±47.39)比较无显著的统计学差异(P>0.05)。结论:1. ADM能降低脓毒症血清刺激RIMMVECs后培养上清液中VCAM-1的含量,说明ADM甚至能减少脓毒症时RIMMVECs中VCAM-1向体液中的释放;2. ADM处理组在细胞内VCAM-1mRNA的表达水平低于脓毒症组,说明ADM能抑制VCAM-1在脓毒症时在内皮细胞中的转录;3.ADM能降低脓毒症血清刺激RIMMVECs后RIMMVECs胞膜上的表达,说明ADM能减少脓毒症时VCAM-1在血管内皮上的表达量。因此从分子水平上论证了ADM通过抑制小肠微血管内皮细胞上,炎症因子释放上游的调控黏附分子VCAM-1的转录、表达和生成,从而减缓或抑制脓毒症的发生发展。