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膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的肿瘤,其临床主要的特点是发病率高、复发率高。已有的研究认为肿瘤患者存在机体免疫功能低下、肿瘤浸润淋巴细胞活性及其对肿瘤细胞的杀伤能力下降,并进而提出了肿瘤免疫抑制的“黑洞”理论,认为膀胱局部免疫功能低下可导致残存肿瘤细胞逃避免疫监视并得以生存和发展,是膀胱肿瘤复发率高的重要原因之一。核转录因子κB(NF-κB)是一种重要的核蛋白,能特异结合于免疫球蛋白κ轻链基因增强子κB序列,广泛存在于淋巴细胞和非淋巴细胞中,通过对多种细胞因子(如:IL-2)、免疫受体(如:IL-2Rα)等免疫相关编码基因转录的调控,在机体免疫功能调节中发挥重要作用。本实验利用细胞共培养技术,对T淋巴细胞中NF-κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用进行了研究。实验分两部分,第一部分,将淋巴细胞分别与膀胱肿瘤细胞、射线照射膀胱肿瘤细胞、正常膀胱移行上皮细胞共培养,采用免疫组化、MTT法、ELISA双抗夹心法、流式细胞仪,检测T淋巴细胞NF-κB核转位情况、T淋巴细胞增殖功能,共培养上清中IL-2和sIL-2R含量、T淋巴细胞膜IL-2R的表达、T淋巴细胞凋亡情况,探讨了T淋巴细胞中NF-κB与膀胱肿瘤抑制T淋巴细胞功能间的关系。第二部分,通过应用不同剂量的NF-κB活性调节剂,改变T淋巴细胞中NF-κB活性,研究了膀胱肿瘤细胞作用下T淋巴细胞中NF-κB活性改变与T淋巴细胞功能以及T淋巴细胞IL-2信号系统变化间的关系,对第一部分实验结论进行了应证,初步探讨了基于NF-κB转录调控通路治疗膀胱肿瘤的可能性。实验主要结果如下:1.膀胱肿瘤细胞EJ、T24可抑制T淋巴细胞增殖活性,增加T淋巴细胞凋亡。2.膀胱肿瘤细胞EJ、T24可降低T淋巴细胞中NF-κB活性。3.膀胱肿瘤细胞EJ、T24可减少细胞共培养上清中IL-2和sIL-2R含量,降低T淋巴细胞膜表面IL-2R表达。4.膀胱肿瘤细胞可通过降低T淋巴细胞中NF-κB活性,下调T淋巴细胞IL-2和T<WP=10>淋巴细胞膜IL-2R表达,阻碍T淋巴细胞IL-2刺激信号,抑制T淋巴细胞功能。5.通过上调T淋巴细胞中NF-κB活性,可逆转膀胱肿瘤细胞EJ、T24所致的T淋巴细胞增殖活性降低和T淋巴细胞凋亡增加,使膀胱肿瘤细胞EJ、T24的凋亡增加,可见基于NF-κB转录调控通路治疗膀胱肿瘤是可能的。6.IL-2信号系统可能是NF-κB在免疫细胞功能调控中重要的下游通路,是基于NF-κB转录调控通路治疗膀胱肿瘤的一个后选靶点。