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大豆根腐病(Soybean root rot)是引起我国大豆产量损失的主要因素之一。目前大豆根腐病的防治主要依靠种植抗病品种和施用化学农药。化学农药的使用虽然在一定程度上有助于大豆根腐病的控制,但是在农药的使用过程中病原菌的抗药性也在增强,并且化学农药的大量使用也会造成环境污染等一系列问题。生物防治是植物病害绿色防控的发展趋势。植物内生细菌定殖于植物体内,不易受外界环境影响,有些内生细菌还具有产生抗菌物质、与病菌竞争生态位和营养物质、诱导植物产生抗性等有益生物学作用。因此,近几年用内生细菌来防治植物病害受到了人们的极大关注,并且取得了显著的效果。本文主要研究目的是筛选鉴定对大豆根腐病有拮抗作用的内生细菌,并测定其对大豆根腐病的生防效果。本研究将大豆疫霉(Phytophthora sojae)、木贼镰孢菌(Fusarium equiseti)、茄腐镰孢菌(F.solani)和尖镰孢菌(F.oxysporum)分别接种到不同品种的大豆幼苗上,选择其中未发病的植株为材料分离内生细菌,并筛选对上述病原菌具有拮抗作用的菌株。经过分离获得126株大豆内生细菌,用平板对峙法从中筛选获得11株对上述4种病原菌均具有明显拮抗作用的内生细菌。利用16s rDNA和gyrB序列分析对菌株进行测序鉴定,结果显示:3、6、9、10、15、17、18和19号菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)、41号菌株为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)、1号菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolibacillus)、4号菌株为克雷伯氏菌(Klebsiella sp)。进一步选取抑菌作用强的菌株做抑菌谱测试,结果显示:10号菌株和19号菌株对多种供试病原菌具有广谱性的抑制作用,10号菌株对大豆疫霉、木贼镰孢菌、旋柄植物腐霉的抑制率分别为84%、71%和75%,19号菌株对大豆疫霉、木贼镰孢菌、旋柄植物腐霉(Phytopythium helicoides)的抑制率分别为 83%、72%和 70%。诱导拮抗内生细菌10号、19号和41号获得抗利福平标记,得到了抗利福平标记菌株10R、19R和41R。检测了抗性标记菌株在大豆内的定殖情况及对大豆根腐病的防治效果,结果显示:菌株41R能在大豆根部稳定定殖,定殖量先增后减最后趋于稳定,在灌根4天时达到最大定殖量9.6×103cfu/g,在32天时定殖量为3.4×103 cfu/g;此外,菌株41R还可以向上转移定殖到大豆的茎部和叶部。菌株10R、19R和41R对部分大豆根腐病病原菌均具有一定防效,对木贼镰孢菌的防效为70%-95%,对旋柄植物腐霉的防效为3%-33%,对大豆疫霉菌株P6497的防效为23%-58%。通过检测病原菌在发病组织中的相对生物量,进一步证明10R、19R和41R均可以降低木贼镰孢菌、大豆疫霉菌株P6497、旋柄植物腐霉对大豆的侵染能力。本研究从大豆组织中分离筛选到对大豆根腐病具有拮抗作用的内生细菌,并测试其抑菌谱,检测其在大豆植株内的定殖能力和动态变化,探究其在温室内对大豆根腐病的防治效果,为利用大豆拮抗内生细菌防治大豆根腐病提供了研究材料和经验。