抑郁症是严重危害人类身心健康的慢性心境障碍疾病,具有高发病率、高致残率和高自杀率。抑郁症严重困扰患者的工作和生活,给家庭和社会带来沉重的负担。世界卫生组织、世界银行和哈佛大学的一项联合研究表明,抑郁症已经成为中国疾病负担的第二大病。关于抑郁症的发病机制目前比较公认的有细胞因子学说、单胺神经递质学说、下丘脑-垂体-肾上腺轴学说和神经元可塑性改变。近年来,色氨酸代谢通路异常也逐渐成为抑郁症发病机制研究的切入点。单胺神经递质学说认为主要与中枢神经系统5-HT、去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)水平降低有关,临床上抗抑郁药主要也是通过增加神经突触间这几种递质浓度而发挥抗抑郁作用。“湿阻气滞”是中医理论中抑郁症证候分型的一种。中药厚朴作为燥湿消痰、下气除满的传统中药,在抑郁症中的应用和研究近年来受到国内外较多关注。现代研究表明,半夏厚朴汤、栀子厚朴汤等复方具有抗抑郁作用,厚朴的主要成分厚朴酚、和厚朴酚均可产生抗抑郁作用。但对于厚朴抗抑郁作用,仍有待于结合其相关成分进行全面的评价和深入的机制研究。本研究以中药厚朴的有效成分和厚朴酚为载体,采用多个抑郁模型对和厚朴酚抗抑郁药效学及其机制进行系统研究。1.和厚朴酚对药物抑郁小鼠模型的作用目的:研究和厚朴酚对小鼠药物抑郁模型的抗抑郁作用。方法:采用利血平拮抗、5-羟色氨酸(5-HTP)增强等小鼠抑郁模型,观察和厚朴酚低、中、高剂量组(2.5、5、10mg/kg)对利血平所致小鼠体温下降、眼睑下垂、运动不能的拮抗作用;以及对5-HTP诱导小鼠甩头行为的影响。结果:1.利血平拮抗模型:与空白组相比,模型组小鼠体温明显下降(P<0.01)、眼睑下垂及运动不能个数均明显增加(P<0.01);与模型组相比,和厚朴酚低、中、高剂量组均可拮抗利血平所致小鼠体温下降(P<0.01)、中、高剂量组眼睑下垂个数减少(P<0.05)、中剂量组运动不能个数减少(P<0.05);2.5-HTP诱导甩头模型:与模型组相比,和厚朴酚低、中、高剂量组均可明显增强5-HTP诱导的小鼠甩头行为(P<0.05)。结论:和厚朴酚可以改善利血平拮抗模型及5-HTP诱导甩头模型小鼠的抑郁行为,具有一定的抗抑郁作用,其作用机制可能与增加突触间单胺类神经递质有关。2.和厚朴酚对强迫游泳小鼠的抗抑郁作用及机制研究目的:研究和厚朴酚对强迫游泳小鼠的抗抑郁作用及其机制。方法:采用小鼠强迫游泳模型(FST),将75只小鼠随机分为模型组、氟西汀组、和厚朴酚组(2.5,5,10 mg/kg),给药7d,观察小鼠强迫游泳不动时间,采用Elisa试剂盒检测小鼠脑组织中去甲肾上腺素(NA)、5-羟色胺(5-HT)及吲哚2,3-双加氧酶(IDO)含量。结果:与对照组比较,氟西汀组及和厚朴酚低、中、高剂量组小鼠强迫游泳不动时间明显缩短(P<0.05);和厚朴酚中、高剂量组脑NA含量明显增加(P<0.05);氟西汀组及和厚朴酚中、高剂量组脑5-HT含量明显增高(P<0.05,P<0.01)。结论:和厚朴酚可以改善强迫游泳抑郁小鼠抑郁行为,具有一定抗抑郁作用,其主要作用机制与增加大脑中NA及5-HT水平有关。3.和厚朴酚对慢性应激小鼠的抗抑郁作用及机制研究目的:研究和厚朴酚对慢性应激小鼠的抗抑郁作用及其机制。方法:采用慢性应激小鼠模型,将60只小鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、和厚朴酚低、中、高剂量组(2.5,5,10 mg/kg),除空白组外,其他各组小鼠采用噪声加束缚的方式进行2周应激刺激,造模同时各治疗组小鼠分别给与相应的治疗药物,观察小鼠强迫游泳不动时间,采用Elisa试剂盒检测小鼠脑组织中5-HT、IDO含量及血清中皮质酮含量,采用实时荧光定量PCR检测脑组织中IDOmRNA的表达情况。结果:与空白组比较,模型组强迫游泳不动时间明显增加(P<0.01),脑组织5-HT含量明显降低(P<0.01),脑组织IDO含量、IDO mRNA表达水平明显增加(P<0.01),血清皮质酮含量明显增加(P<0.01);与模型组比较,和厚朴酚低、中、高剂量组强迫游泳不动时间、脑组织IDO含量及IDO mRNA表达水平均明显降低,脑组织5-HT含量明显增加,血清皮质酮含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:和厚朴酚可以改善慢性应激抑郁小鼠抑郁行为,具有一定抗抑郁作用,其主要作用机制与降低色氨酸通路限速酶IDO含量及基因表达水平,促进色氨酸转化为5-HT,增加大脑中5-HT水平有关。4.和厚朴酚对慢性应激抑郁模型大鼠的抗抑郁作用目的:研究和厚朴酚对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元可塑性的影响。方法:采用大鼠慢性应激抑郁模型,将60只大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、和厚朴酚组(1.75,3.5,7mg/kg),除空白组外,其他各组大鼠均给予温和不可预知性刺激进行为期6周的造模,造模同时各治疗组大鼠分别给与相应的治疗药物,通过旷场实验、糖水消耗实验等行为学指标观察模型是否成立,免疫组织化学检测法检测海马5-HT1A、GR2及NMDAR1受体含量,免疫荧光双标记法检测Ki67/GFAP、Ki67/NeuN标记情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠旷场实验活动得分及糖水消耗量均明显减少(P<0.01),海马GR2受体含量明显减少(P<0.01),海马NMDAR1受体含量明显增加(P<0.01);与模型组比较,和厚朴酚低、中、高剂量组旷场实验活动得分及糖水消耗量均明显增加(P<0.05),和厚朴酚中剂量组海马GR2受体含量显著增加(P<0.01),和厚朴酚各剂量组海马NMDAR1受体含量均显著减少(P<0.05)。慢性应激大鼠模型及各药物治疗组,海马中未见新生星形胶质细胞及新生神经元表型明显改变。结论:和厚朴酚可以改善慢性应激大鼠的抑郁样行为,具有一定的抗抑郁作用,其主要作用机制与修复海马GR2的异常变化,降低NMDAR1受体含量,抑制NMDA受体的持续兴奋状态,减缓神经毒性有关。5.和厚朴酚对慢性应激联合脂多糖(LPS)小鼠抑郁模型炎性因子及游离钙离子含量的影响目的:研究和厚朴酚对慢性应激联合LPS小鼠抑郁模型炎症因子及游离钙离子含量的影响。方法:采用慢性应激和脂多糖注射建立模型,将90只小鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、和厚朴酚中、高剂量组(5,10mg/kg),除空白组外,其他各组小鼠采用噪声加束缚的方式进行10d应激刺激,第11d腹腔注射脂多糖,观察小鼠强迫游泳不动时间,造模同时各治疗组小鼠分别给与相应的治疗药物,采用Elisa试剂盒检测小鼠脑组织中IFN-γ含量,采用放射免疫法检测血清中TNF-α、IL-1β、IFN-γ含量,采用流式细胞术检测小鼠大脑组织中游离钙离子浓度。结果:与空白组比较,模型组强迫游泳不动时间明显增加,脑组织中IFN-y含量明显增加,血清中TNF-α、IL-1β、IFN-y含量明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,和厚朴酚中、高剂量组强迫游泳不动时间明显减少,和厚朴酚高剂量组脑组织中IFN-γ含量明显减少,和厚朴酚中、高剂量组血清中TNF-α、IL-1β、IFN-γ含量均明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),高剂量组脑组织游离钙离子含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:对于慢性应激联合LPS诱导抑郁模型小鼠,和厚朴酚表现出一定的抗抑郁作用,其作用机制与减少TNF-α、IL-1β、IFN-γ等炎性因子含量,抑制炎性反应,抑制中枢细胞钙超载有关。