论文部分内容阅读
本文介绍了石斛的利用价值,综述了国内外在石斛离体培养和快速繁殖方面的研究现状。在此基础上,以大苞鞘石斛和美花石斛为材料,进行再生体系的构建和形态发生方面的研究与探讨,主要结论如下:①侧芽灭菌适宜的方法:75%的酒精浸泡30s,无菌水冲洗2-3次,再用0.1%的升汞(加两滴Tween20 )溶液消毒8-10min,用无菌水冲洗4-5次。②大苞鞘石斛种子萌发的适宜培养基为MS+6-BA(0.5-1.0)mg/L+NAA0.1 mg/L或者选用N6+6-BA (2.0-3.0mg/L)+NAA0.4mg/L。适宜大苞鞘石斛不定芽诱导和增殖的培养基分别为:MS或N6+6-BA4.0mg/L+NAA0.5mg/L和1/2 MS+ 6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L。美花石斛芽诱导和增殖的适宜培养基分别为:MS或1/2MS+6-BA 3.0mg/L + NAA 0.3或0.4mg/L和MS + 6-BA 6.0mg/L+NAA0.2 mg/L。③大苞鞘石斛适宜的拟原球茎诱导和增殖分化的培养基分别为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.5mg/L+TDZ0.025mg/L+CH1g/L+CM10%(v/v)或MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.5mg/L+KT2.0mg/L+CH1g/L+CM10%(v/v)。④大苞鞘石斛愈伤组织诱导的适宜培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D 2.0mg/L,适宜美花石斛愈伤组织诱导的培养基为1/2MS+ 6-BA1.0mg/L + 2,4– D 0.5 mg/L.以大苞鞘石斛无菌苗进行愈伤组织诱导时发现,只有幼嫩组织才能诱导出愈伤,对美花石斛愈伤组织的诱导也得到相似结果,成熟茎段及叶片很难脱分化。⑤石斛植株再生有两种途径:直接发生和间接发生。本实验通过组织细胞学方法研究拟原球茎和愈伤组织发生过程的形态变化,发现诱导出的愈伤组织可分为两种,即胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织。非胚性愈伤组织边缘的细胞逐渐会向胚性愈伤组织状态转化,两种愈伤组织往往同时发生。胚性愈伤组织上可直接形成体细胞胚,体细胞胚与胚性愈伤组织之间通过胚柄结合,体胚发育成原球茎后很容易从胚性愈伤组织上脱落下来。