生物膜对儿童腺样体肥大致病机制的初步研究

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腺样体肥大是耳鼻咽喉-头颈外科儿童多发的一种鼻咽部疾病,多是病理性增生,往往是因为各种因素产生的炎症介质反复、长期刺激而发生。国内外大量的研究证明,腺样体病理性肥大及其并发症,与细菌在腺样体表面形成的生物膜所造成的慢性感染密切相关。生物膜(BF)是细菌形成的、与浮游菌相对应的、为了适应外界环境变化的另一种生长方式,是一种混杂的、持续变化的、动态的细菌群落,是有一定空间构型的细菌群体,是由DNA、RNA、纤维蛋白、被覆细菌、细菌脂多糖等成分组成。由于生物膜形成,使细菌对抗生素的耐药性增强10~1000倍,常规用药量很难彻底清除,造成疾病慢性迁延反复病程,给临床上治疗带来许多困扰。本研究针对腺样体上是否有生物膜形成,通过检测在人类先天性免疫反应以及特异性免疫应答中均具有重要作用的TLR2、TLR4在儿童肥大腺样体组织中的表达情况,以及细胞因子IL-12、IL-17在腺样体肥大患儿血清中的含量,探讨生物膜与腺样体肥大发病机制之间的关系。收集2015年5月至2016年1月手术切除的肥大腺样体组织及对应的血清60例,健康儿童血清17例,通过腺样体组织细菌分离、培养、鉴定,分为有生物膜组和无生物膜组。应用ELISA法测定患儿及健康儿童血清中IL-12、IL-17的含量,并应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)技术检测肥大腺样体组织中TLR2、TLR4的表达情况。分别对各组间IL-12、IL-17含量的差异和TIL2、TLR4表达进行对比研究。60例患儿肥大腺样体组织有生物膜的27例,无生物膜33例。构成生物膜的细菌有葡萄糖球菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌,三种细菌体外培养72h后电镜观察均能形成明显生物膜。肥大腺样体患儿血清IL-12、IL-17的含量均高于健康儿童组(P<0.05),有生物膜的腺样体肥大组血清IL-12的含量与无生物膜组无显著差异(P>0.05),有生物膜的腺样体肥大组血清IL-17含量明显高于无生物膜的腺样体肥大组(P<0.05)。所有肥大腺样体组织中均检测到有TLR2、TLR4表达,有生物膜的肥大腺样体组织中TLR2、TLR4m RNA表达水平与无生物膜腺样体肥大组无显著差异(P>0.05;P>0.05)。综上实验得出,细菌在肥大腺样体组织表面形成生物膜是造成腺样体病理性肥大的危险因素之一。IL-17和IL-12与腺样体肥大均相关,且IL-17的表达可能在生物膜致腺样体肥大发病中发挥作用。腺样体肥大组织中TLR2、TLR4均升高,不论是游离菌还是生物膜形成对其表达无影响。
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