目的观察酸处理对老龄大鼠离体心脏缺血再灌注后冠脉流量以及pH值的影响;评价酸处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及心肌PI3K信号通路在其中的作用。方法1.酸处理对老龄大鼠离体心脏缺血再灌注后pH值影响的试验观察清洁级老龄SD大鼠(≥18个月)24只SD大鼠(≥18个月),体重450～550 g ,随机分为缺血再灌注(C)组、缺血后处理(IPO)组和酸处理(H+)组,每组各8只。采用Langendorff装置行离体心脏灌注,采用全心停灌30 min后、再灌注中性K-H液(pH值7.4)120 min的方法制备大鼠离体心脏再灌注模型。IPO组于再灌注即刻灌注pH值7.4的K-H液15 s,停灌15 s,重复6次;H+组于再灌注即刻灌注经80% O2-20% CO2饱和的酸性K-H液(pH值6.9)3 min。各组处理后改用中性K-H液持续灌注至实验结束。分别监测各组老龄大鼠冠脉流出液在停灌前、再灌注后3 min、5 min以及8 min的pH值,并观察停灌前、再灌注后3 min、10 min以及30 min冠脉流量(CF)的变化。2.酸处理对老龄大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及PI3K信号通路的作用清洁级老龄SD大鼠(≥18个月)70只,雌雄不限,体重450～550 g ,随机分为7组(n=10):随机分为7组(n=10):缺血再灌注组(C组)、缺血后处理组(IPO组)、酸处理组(H+组)、缺血后处理+碱处理组(IPO+OH-组)、碱处理组(OH-组)、酸处理+渥曼青霉素组(H++wort组)和渥曼青霉素组(wort组)。采用Langendorff装置行离体心脏灌注,采用全心停灌30 min后、再灌注中性K-H液(pH值7.4)120 min的方法制备大鼠离体心脏再灌注模型。IPO组于再灌注即刻灌注pH值7.4的K-H液15 s,停灌15 s,重复6次;H+组于再灌注即刻灌注经80% O2-20% CO2饱和的酸性K-H液(pH值6.9)3 min;IPO+ OH-组于再灌注即刻灌注灌注100% O2饱和的碱性K-H液(pH值7.8)15 s,停灌15 s,重复6次;OH-组于再灌注即刻灌注碱性K-H液灌注3 min;H++wort组于再灌注即刻用灌注含100 nmol/L渥曼青霉素的酸性K-H液3 min; wort组于再灌注即刻灌注含100 nmol/L渥曼青霉素的中性K-H液3 min。各组处理后改用中性K-H液持续灌注至实验结束。观察不同时点:停灌前和再灌注5 min、15 min、30 min血流动力学指标,心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、冠脉流量(CF)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左室内压最大下降速率(-dp/dtmax);于再灌注30 min测定冠状动脉流出液一氧化氮(NO)浓度及心肌组织中一氧化氮合酶(NOS)活性;再灌注120 min后取下心脏用TTC染色,计算心肌梗塞区与缺血危险区的质量比(IS/AAR),反映心肌梗塞面积。结果(1)停灌前三组冠脉流出液的pH值无明显差异(P>0.05);与C组比较,IPO组和H+组再灌注后3 min时冠脉流出液pH值降低(P<0.05),IPO组和H+组两两相比无明显差异(P>0.05),三组于再灌注后5min和8min冠脉流出液pH值均无明显差异(P>0.05)。与C组比较,IPO组和H+组再灌注后3 min、10 min和30 min时的冠脉流出液量增加(P<0.05),IPO组和H+组两两相比无明显差异(P>0.05)。(2)停灌前各组指标无明显差异,大鼠心脏缺血再灌注后,与C组比较,IPO组和H+组再灌注时HR、LVSP、CF、±dp/dtmax升高(p <0.05),心肌梗塞面积减少,冠状动脉流出液NO浓度升高,心肌组织NOS含量升高;IPO+OH-组心肌梗塞面积差异无统计学意义(P>0.05),OH-组、H++wort组和wort组心肌梗塞面积增加(P<0.05或0.01),HR、LVSP、CF、±dp/dtmax,冠状动脉流出液NO浓度降低和心肌组织NOS含量差异无统计学意义(P>0.05);IPO组和H+组两两比较以上指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论(1)持续3 min低pH液灌注的酸处理和缺血后处理对老龄大鼠离体心脏再灌注后冠脉流量及pH值的影响相似。(2)酸处理可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,保护作用与缺血后处理相似,其机制可能与激活PI3K信号通路有关。