【摘 要】
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目的 c-erbB-2基因编码一个185kD的糖蛋白,是酪氨酸激酶受体,是表皮细胞生长因子受体（Epidermal Growth Factor-Receptor,EGFR）家族的一员。而c-erbB-2癌基因在人乳腺癌、卵巢
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目的 c-erbB-2基因编码一个185kD的糖蛋白,是酪氨酸激酶受体,是表皮细胞生长因子受体（Epidermal Growth Factor-Receptor,EGFR）家族的一员。而c-erbB-2癌基因在人乳腺癌、卵巢癌、肺癌等多种癌症中扩增及过量表达,与肿瘤恶性程度增高、转移能力增强、化疗抵抗密切相关,并且预后不良。RNA干扰（RNA interfering,RNAi）技术是一种新兴的基因治疗技术,能有效、特异地抑制细胞内基因的表达。本实验应用RNAi技术研究靶向c-erbB-2基因的siRNA（Small interfering RNA）对c-erbB-2过表达的肺腺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡过程及顺铂药物敏感性的影响。 方法 用化学合成的靶向c-erbB-2基因siRNA在脂质体的介导下转染肺腺癌calu-3细胞,观察转染前后细胞表型的改变;RT-PCR测定细胞中c-erbB-2、Cyclin D1 mRNA水平;流式细胞术检测c-erbB-2蛋白水平、细胞周期和细胞凋亡的变化;MTT法测定肺癌细胞株calu-3的增殖抑制及顺铂（CDDP）对转染siRNA癌细胞的增殖抑制作用;荧光分光光度法测定Caspase-3活性;ELISA技术检测培养液上清中VEGF水平。 结果 靶向c-erbB-2基因的siRNA降低了c-erbB-2 mRNA和蛋白的表达水平且对肺癌细胞株增殖有抑制作用,使细胞周期阻滞发生在细胞周期的G0/1期,并能诱导凋亡。转染c-erbB-2 siRNA后Cyclin D1mRNA水平
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