“饥饿”和/或地塞米松以及发光二极管照射对分化后C2C12蛋白含量影响的实验研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:newpeoplea
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目的:大强度的离心运动之后常发生的延迟性肌肉酸痛(DOMS)。DOMS的机理与防治一直是运动科学的研究热点。在DOMS经历的Z带撕裂、损伤蛋白质降解和蛋白质合成三个主要阶段中,损伤蛋白质的泛素-蛋白酶体特异性蛋白质降解途径(UPP)降解是主要的限速过程,而对损伤蛋白质UPP降解贡献最大的是糖皮质激素(GC)通路的激活。我们的实验采用地塞米松(DEX)刺激分化后的C2C12细胞,复制GC引起蛋白质降解的离体细胞模型,在此基础上采用发光二极管(LED)照射观察其对GC引起蛋白质降解作用的影响。 方法:实验1:分化4天后的C2C12细胞分为正常组、Unfed组、DEX组和Unfed加DEX组,正常组每天换液,Unfed组不换液,DEX组每天更换的培养基中含100nM的DEX,Unfed加DEX组自第4天加入含100nM DEX的培养基后不予换液。从分化后第5天起每天测定细胞的蛋白含量,测定方法采用CBA法。实验2:分化4天后的C2C12细胞分为正常组、DEX组和DEX+LED照射组,其中DEX+LED照射组从分化开始后第4天起,每天换液后12h给予LED照射15min,共2天。LED供电电流60mA,波长650±17nm,剂量分别为207 mJ/cm~2、435.6 mJ/cm~2、662.4mJ/cm~2和1194.3 mJ/cm~2。分化后第6天测定蛋白含量。 结果:实验1:Unfed组与DEX组以及Unfed加DEX组都能使分化4天后的C2C12细胞的蛋白含量极为显著低于正常组(P<0.01),同时DEX组和Unfed+DEX组分细胞蛋白含量又极为显著低于Unfed组(P<0.01),而DEX组与Unfed+DEX组之间无显著差异(P>0.05)。实验2:在采用单纯DEX刺激方式复制的肌肉萎缩模型基础上,2天照射后,各照射组蛋白量占DEX组蛋白量的百分比分别为:92.1%、99.0%、107.4%和95.9%。经2天662.4 mJ/cm~2的LED照射使分化后C2C12蛋白含量显著高于DEX组(模型组)(P<0.05),经2天207 mJ/cm~2 LED照射后,分化后C2C12的蛋白含量下降了7.9%,但是没有统计学上的显著性。435.6 mJ/cm~2和1194.3 mJ/cm~2的LED照射分化后C2C12蛋白含量与DEX组相比没有显著差异(P>0.05)。 结论:用100nM的DEX作用于分化后的C2C12细胞可明显促进蛋白质降解,
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