健康人群肠道分节丝状菌(SFB)的调查以及雌马酚转化的研究

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本论文首先调查了人体肠道分节丝状菌(Segmented filamentous bacteria, SFB)在人群中的分布。然后进一步开展了人粪样中雌马酚含量的分布调查及其与肠道菌群关系的研究。本论文的第一部分就是收集了251例人(年龄从刚出生6个月到72岁),92只小鼠(断奶后3个月)和72只青年鸡(孵化后15天)肠道内容物样品。通过SFB的PCR特异引物调查了样品中SFB的分布特点。我们在人肠道中检测到SFB的存在,并且发现SFB主要分布在6到24个月的婴儿肠道内。婴儿年龄超过3岁后,SFB的定植消失。本论文的第二部工作是研究了人粪样中雌马酚含量调查及其与肠道菌群的关系。本论文做了以下研究:1、为了调查人肠道内容物中大豆素和雌马酚的含量及其与年龄和性别的关系,我们用HPLC双波长检测方法对来自杭州市的125份粪便样品进行了大豆素和雌马酚含量的检测,并进行了统计学分析。HPLC检测结果统计学分析发现,尽管粪便样品中雌马酚含量的高低与性别关系不大,但却与年龄大小存在很大的相关性,40-50岁年龄组的粪便样品中雌马酚的含量明显高于其它年龄组。2、为了了解肠道内容物中雌马酚产生菌的分布状况;探索雌马酚产生与肠道菌群之间的关系,我们使用PCR-DGGE的方法对雌马酚含量与肠道菌群的关系进行了研究。PCR-DGGE结果表明,肠道内容物中雌马酚含量的高低与肠道菌群结构无明显相关性。3、为了从人粪样中分离纯化雌马酚产生菌。我们使用以下4种添加了大豆素的培养基:BHI、VI、VL、M9,在厌氧环境下进行了选择性富集培养与分离。并每隔6小时使用HPLC对雌马酚的产量,以及其大豆素的转化率进行检测。HPLC检测结果发现,BHI对人粪样中雌马酚产生菌的富集效果最好,添加大豆素浓度为50ug/ml,培养24小时之后发酵液中雌马酚浓度达到38.8ug/ml。综上所述,本论文开展了对人体肠道微生物SFB的分布和对雌马酚转化功能的研究。验证了年龄因素对人体肠道微生物结构和生理功能的影响。
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