目的:建立人类体外受精和胚胎移植术(IVF-ET)联合未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)培养系统;初步探讨IVM的影响因素。方法:选择2008年11月至2009年3月在兰大一院生殖医学研究中心接受IVF-ET术及其衍生技术助孕的52名患者,经患者知情同意将取卵过程中获得的未成熟卵母细胞进行体外成熟培养、卵泡浆内单精子注射(ICSI)受精和胚胎培养,应用程序化冷冻方法冷冻保存具有发育潜能的胚胎。分组研究未成熟卵母细胞开培养于IVM卵母细胞培养液的不同时间,培养不同生长阶段未成熟卵母细胞以及体外培养过程中是否脱去颗粒细胞对IVM的影响。比较分析未成熟卵母细胞体外培养成熟后的受精及卵裂情况与同期常规体外受精获得的成熟卵母细胞的受精及卵裂情况。结果:实验共培养未成熟卵母细胞136枚,其中培养成熟96枚,成熟率为70.6%;受精55枚,受精率为55.2%;卵裂35枚,卵裂率为64.2%。冷冻2-3级胚胎13枚。取卵日开始体外培养的未成熟卵母细胞成熟率、受精率高于取卵后24h开始体外培养;处于第一次减数分裂中期(MI)的未成熟卵母细胞比生发泡期(GV)的未成熟卵母细胞更易培养成熟;与裸卵(NO)组比较,卵冠丘复合体(COCs)组体外培养的成熟率、受精率更高;体外成熟组的卵裂率低于体内成熟组。结论:本研究初步建立了常规体外授精结合未成熟卵母细胞体外成熟培养系统;未成熟卵母细胞在IVM培养液比在人输卵管液中培养更有利于体外成熟、提高卵母细胞的质量;卵子与卵丘颗粒细胞共培养有利于未成熟卵母细胞的体外成熟、受精和胚胎的进一步发育;IVM的胚胎发育潜能低于IVF和ICSI周期,但未成熟卵母细胞可以在体外发育成早期胚胎并用于胚胎移植。