EGCG抑制人胃腺癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤生长及新生血管形成实验研究

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目的: 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃腺癌细胞(SGC—7901)裸鼠移植瘤生长及新生血管形成的抑制作用,并探讨其分子机制。 方法: 1.EGCG对体外培养人胃腺癌SGC-7901细胞增殖的影响:采用MTT比色法求EGCGIC50值、绘制细胞生长曲线、求群体倍增时间并检测细胞活力,观察EGCG对SGC-7901细胞的生长抑制作用。 2.人胃腺癌SGC-7901细胞裸鼠异种移植瘤模型的建立和分组:BALB/C裸小鼠分别于背侧靠腋窝皮下接种0.2ml/只(相当于2×10~6个细胞)。30只实验裸鼠分为6组,即生理盐水对照组、5-氟尿嘧啶阳性药对照组、米诺环素(Minocyeline)血管形成抑制剂阳性药对照组、5mg/kg浓度EGCG组、10mg/kg浓度EGCG组、20mg/kg浓度EGCG组。成瘤后,生理盐水对照组隔日腹腔注射生理盐水,其余各组隔日腹腔给药。 3.评价EGCG治疗人胃癌的有效性:绘制裸鼠异种移植瘤体积生长曲线,处死裸鼠后称瘤重,计算抑瘤率;Western blot检测不同浓度EGCG及阳性对照药对移植瘤组织细胞核转录因子NF-кB(P65)蛋白表达的影响;间接免疫荧光标记流式细胞术检测移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)荧光峰值的表达情况;酶联免疫吸附技术(ELISA法)检测各组裸鼠血清中VEGF的浓度;采用免疫组化SP法对移植瘤中VEGF、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达进行检测及计数CD34标记的微血管密度。 结果 1.在体外抗癌细胞增殖实验中,EGCG对人胃腺癌SGC—7901细胞MTT比色结果显示EGCG能呈浓度依赖性抑制SGC—7901细胞增殖,不同浓度EGCG(20μg/ml、
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