辅助性T细胞17（T helper17cell，Th17）是一种新发现的CD4+效应T细胞，Th17细胞在IL-23的诱导下增殖、活化并分泌IL-17、IL-21、IL-22以及TNF-α等多种细胞因子。目前越来越多的证据表明，Th17细胞及其相关因子参与了银屑病的发病。Th17细胞及其相关因子在银屑病发病机制中的作用给银屑病的研究及治疗提供了新的方向和策略。本课题将临床研究与基础实验相结合，以寻常型银屑病血热证患者为研究对象，探索寻常型银屑病血热证与TH17相关因子病理变化的相关性，为研究药物治疗寻常型银屑病血热证寻找作用靶点；选择凉血活血汤进行治疗血热证患者，比较治疗前、后TH17相关因子的变化，从抑制TH17相关因子的角度，进一步提供了凉血活血汤治疗寻常型银屑病血热证的实验室证据。实验一寻常型银屑病血热证与TH17相关因子病理变化的相关性分析目的：探索寻常型银屑病血热证与TH17相关因子病理变化的相关性，为研究药物治疗寻常型银屑病血热证寻找作用靶点。方法：以寻常型银屑病血热证患者为研究对象，记录患者的一般情况、临床表现（PASI评分、中医主要症状评分和H.E.病理）、外周血血清TH17相关细胞因子、皮肤组织TH17相关蛋白的表达。分析寻常型银屑病血热证患者外周血中TH17相关因子的表达水平与临床表现（PASI评分、中医主要症状评分和表皮厚度）的相关性，比较不同皮损部位的TH17相关蛋白表达差异。结果：在患者就诊时，一共记录22例寻常型银屑病血热证患者鳞屑、红斑、浸润、皮损面积情况，计算出PASI评分（4.24-19.35），平均PASI评分：12.21±5.25。记录22例寻常型银屑病血热证患者的中医主要临床症评分（12-23），平均中医主要临床症评分：17±4.62。记录22例寻常型银屑病血热证患者皮损组织H.E.病理，平均表皮厚度:153.2±30.4μm。抽取22例寻常型银屑病血热证患者的肘静脉血，离心后检测血清中细胞因子IL-17a为232.38±47.38pg/ml、IL-1β为23.71±9.73pg/ml、INF-γ为43.29±6.28pg/ml、IL-4为17.52±5.62pg/ml。由于IL-17a、IL-1β、INF-γ、IL-4浓度呈偏态分布，于是选用Spearman检验进行分析，IL-17a与PASI评分、中医主要症状评分呈正相关（r=0.89, p <0.001；r=0.77, p <0.001），与表皮厚度不呈相关（r=0.18, p=0.42）；IL-1β与PASI评分、中医主要症状评分不呈相关（r=0.23, p=0.31；r=-0.02, p=0.93），与表皮厚度呈正相关（r=0.67, p <0.001）；INF-γ、IL-4与PASI评分、中医主要症状评分、表皮厚度均无相关性。蛋白质印迹（Western Bolt）法检测STAT3在皮损组织的表达明显高于距皮损边缘5cm的组织（t=2.66, p=0.019），但与皮损边缘组织无明显差异（t=0.99,p=0.34）；P-STAT3在皮损组织的表达明显高于皮损组织边缘组织和距皮损边缘5cm的组织（t=2.47, p=0.027；t=3.07, p=0.008）；ROR-γ在皮损组织的表达与皮损边缘组织、距皮损边缘5cm的组织无明显差异（t=0.64, p=0.53；t=0.43, p=0.67）。结论：1. IL-17a与PASI评分、中医主要症状评分呈正相关（r=0.89, p <0.001；r=0.77, p <0.001），与表皮厚度不呈相关（r=0.18, p=0.42）；IL-1β与PASI评分、中医主要症状评分不呈相关（r=0.23, p=0.31；r=-0.02, p=0.93），与表皮厚度呈正相关（r=0.67, p <0.001）；INF-γ、IL-4与PASI评分、中医主要症状评分、表皮厚度均无相关性。2. STAT3蛋白表达：银屑病血热证患者皮损组织与皮损边缘组织无明显差异，皮损组织显著高于距皮损5cm组织；P-STAT3基因表达：皮损组织明显高于边缘组织和距皮损5cm组织；R0RC2蛋白表达：皮损组织、皮损边缘组织、距皮损5cm组织相比无明显差异。实验二凉血活血汤对寻常型银屑病血热证患者外周血TH17相关因子的干预作用目的：选择凉血活血汤进行治疗血热证患者，比较治疗前、后TH17相关因子的变化，从抑制TH17相关因子的角度，进一步提供了凉血活血汤治疗寻常型银屑病血热证的实验室证据。方法：以寻常型银屑病血热证患者为研究对象，双盲随机分成研究组（31例，予以凉血活血汤口服）和对照组（20例，予以安慰剂口服），记录患者治疗前、后PASI评分、中医主要症状评分、不良反应情况、外周血血清TH17相关细胞因子、外周血TH17相关因子mRNA，比较研究组治疗前、后的差异以及研究组和对照组之间的差异。结果：研究组（31例）皮损随治疗的深入，红斑逐渐色浅，鳞屑逐渐稀少，皮肤逐渐光滑，增厚现象逐渐减轻，治疗6周后，皮损症状有明显的改善（t=4.26,p<0.001），与对照组（20例）相比，治疗6周后，PASI评分低于对照组皮损（t=2.18,p=0.036）；研究组（31例）随治疗的深入，红斑逐渐色浅，皮损灼热感逐渐减轻，瘙痒逐渐减轻，心烦易怒逐渐缓解，治疗6周后，中医主要临床症状有明显的改善（t=5.94, p<0.001）；与对照组（20例）相比，治疗6周后，中医主要临床症状评分低于对照组（t=3.85, p<0.001）。一共记录51例受试者（研究组31例，对照组20例）不良反应情况，51例患者治疗前后未出现生命体征异常，研究组中有2例治疗前后心电图提示异常，可能与其高血压、心脏病等基础疾病有关，其余不良反应均无明显差异。用ELISA法分别检测研究组和对照组第0周、第六周末血热证患者外周血清中IL17a、IL-1β、INF-γ、IL-4表达，发现研究组中IL-17a治疗前、后明显下降(t=2.72, p=0.016)，其余细胞因子治疗前后无明显差异。研究组疗前、疗后相比，外周血中IL-17a mRNA、STAT3mRNA、RORC mRNA的表达明显下降（t=7.36, p <0.001；t=12.5, p <0.001；t=18.53, p <0.001）；对照组疗前、疗后相比，外周血中IL-17a mRNA、STAT3mRNA、RORC mRNA的表达无明显下降（t=2.44, p=0.26；t=-2.33, p=0.88；t=4.53, p=0.11）。结论：凉血活血汤可有效降低银屑病血热证患者PASI评分、中医主要症状评分、外周血IL17a浓度、IL17a mRNA、STAT3mRNA、RORC mRNA等TH17相关因子的表达，并且无明显不良反应。