紧密连接蛋白Claudin-4和ZO-1在火把花根保护油酸肺损伤肺通透性屏障中的机制研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:wangligang987123
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目的通过观察油酸致急性肺损伤大鼠肺组织紧密连接蛋白Claudin-4和ZO-1表达的变化及其与肺通透性屏障指标的关系,探讨火把花根对紧密连接蛋白Claudin-4和ZO-1表达的影响和其可能机制,为临床上使用火把花根治疗急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症(ALI/ARDS)提供治疗策略和理论依据。方法健康SD大鼠45只按照随机对照原则分成正常对照组、急性肺损伤组(ALI组)和火把花根预防组,每组各15只。正常对照组:2ml生理盐水连续灌胃10天,每天2次,第10天灌胃后1h尾静脉注射生理盐水0.04ml/kg;ALI组:2ml生理盐水连续灌胃10天,每天2次,第10天灌胃后1h尾静脉注射油酸(0.04ml/kg),复制大鼠ALI模型;火把花根预防组:火把花根片研磨后溶于2ml生理盐水中,连续灌胃10天(600mg/kg·day),每天2次,第10天灌胃后1h注射油酸;注射后4h采集大鼠肺组织,测定大鼠肺组织湿/干重比(W/D);采集大鼠静脉血血清、支气管肺泡灌洗液(BALF),采用双缩脲法测定肺通透指数(LPI);肺组织固定包埋,行苏木精-伊红(HE)染色进行肺损伤评分(LIS);采用免疫组织化学法测定紧密连接蛋白Claudin-4和ZO-1的表达及定位,观察急性肺损伤后上述蛋白含量的变化及火把花根对上述蛋白表达的影响。结果大体观察正常对照组肺组织未见明显异常;ALI组肺组织肿胀,表面广布出血点;火把花根预防组肺组织轻度肿胀。光镜下观察正常对照组肺泡上皮组织结构完整,肺泡腔及肺间质未见明显病理改变;ALI组肺泡壁欠完整,肺间质毛细血管扩张,肺泡腔内可见大量炎症细胞浸润,红细胞渗出,肺泡间质明显水肿;火把花根组改变较ALI组明显减轻。ALI组LIS较正常对照组明显升高(P<0.01),火把花根组LIS明显低于ALI组(P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.05)。ALI组W/D和LPI分别较正常对照组、火把花根组明显升高(P<0.05),火把花根组W/D高于正常对照组(P<0.01),但火把花根组LPI与正常对照组无明显差异。紧密连接蛋白Claudin-4在正常对照组大鼠肺泡上皮细胞胞膜表达,胞浆也有少量表达。急性肺损伤组累积光密度值(IOD)显著低于正常对照组及火把花根组(P<0.01),火把花根组IOD值较正常对照组升高(P<0.05)。ZO-1在正常对照组大鼠肺泡上皮细胞胞浆大量表达。急性肺损伤组IOD值明显低于正常对照组及火把花根组IOD值(P<0.01),火把花根组IOD值较正常对照组升高(P<0.05)。结论火把花根预先给药对油酸所致大鼠急性肺损伤有一定的保护作用;急性肺损伤时肺通透性屏障破坏,而其主要结构紧密连接蛋白Claudin-4和ZO-1在急性肺损伤早期表达减少,火把花根预先给药组Claudin-4和ZO-1表达增加;火把花根对急性肺损伤的保护作用可能与紧密连接蛋白表达量相关。
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