【摘 要】
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目的:定量蛋白质组学技术筛选胃粘膜非典型增生(GMAH)间质蛋白质,了解微环境在胃癌早期发病过程中的作用机制。方法:1.采用激光捕获显微切割(LCM)技术,分别纯化正常胃粘膜组
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目的:定量蛋白质组学技术筛选胃粘膜非典型增生(GMAH)间质蛋白质,了解微环境在胃癌早期发病过程中的作用机制。方法:1.采用激光捕获显微切割(LCM)技术,分别纯化正常胃粘膜组织(NGM)和GMAH组织间质,获取高纯度的NGM和GMAH间质,经同位素标记(iTRAQ),二维液相色谱联用质谱(2D LC-MS/MS)技术分析,鉴定NGM和GMAH组织间质之间的差异表达蛋白质。2.利用生物信息学软件分析NGM和GMAH间质之间蛋白质的相互作用。3.采用Western-blot与免疫组织化学染色分析差异表达蛋白质在NGM与GMAH组织中的表达。结果:1.本研究采用定量蛋白质组学技术总共鉴定出GMAH间质蛋白质165个,其中GMAH组织中表达上调者99个,下调者66个。2.GMAH间质蛋白质涉及一些与肿瘤相关的信号通路,如p53信号通路、MAPK信号通路、细胞周期与凋亡等;GMAH间质蛋白质与细胞生长、增殖、代谢、凋亡、翻译、代谢、运输、定位和体液免疫应答等生物学过程有关,它们在STRING网络中呈现相互节点,两两间相互联系;3.经Western-blot与免疫组织化学染色证实S100A6和SOD3蛋白质在GMAH组织中表达存在差异,其中SOD3蛋白在GMAH组织中低表达,而S100A6蛋白高表达(P<0.01)。结论:采用激光捕获显微切割结合定量蛋白质组学技术,筛选了165个GMAH间质表达蛋白质,其中上调者99个,下调者66个。
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