【摘 要】
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狄斯瓦螨是蜜蜂的一种体外寄生虫,不仅吸食蜜蜂的脂肪体和淋巴液,还在蜂群中起到了携带、传播蜜蜂病毒的作用,为瓦螨病毒的跨种传播和蜜蜂新发传染病的爆发提供了有利条件。瓦螨病毒多为变异和适应能力强的RNA病毒,其中VDV-1（Varroa d estructor virus 1）更是被证明对蜜蜂有着较强的致病性,然而有关其它瓦螨病毒对蜜蜂感染性和致病性的研究却十分匮乏。为了加深对瓦螨病毒的认知,探究瓦螨
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狄斯瓦螨是蜜蜂的一种体外寄生虫,不仅吸食蜜蜂的脂肪体和淋巴液,还在蜂群中起到了携带、传播蜜蜂病毒的作用,为瓦螨病毒的跨种传播和蜜蜂新发传染病的爆发提供了有利条件。瓦螨病毒多为变异和适应能力强的RNA病毒,其中VDV-1（Varroa d estructor virus 1）更是被证明对蜜蜂有着较强的致病性,然而有关其它瓦螨病毒对蜜蜂感染性和致病性的研究却十分匮乏。为了加深对瓦螨病毒的认知,探究瓦螨病毒对蜜蜂的可能影响,从而为瓦螨病毒对蜂群健康潜在风险的评估奠定理论基础,本课题以中国地区狄斯瓦螨的RNA病毒为主要对象展开研究。本课题的主要研究内容和结果如下:（1）对中国地区侵染中华蜜蜂（Apis cerana cerana,简称中蜂）和意大利蜜蜂（Apis mellifera liguustica,简称意蜂）的狄斯瓦螨（Varroa destructor）进行RNA测序,分析其常见蜂群病毒的感染情况,并探索可能存在的新病毒。结果表明,黑蜂王台病毒（Blackqueen cellvirus,BQCV）、残翅病毒（Deformed wing virus,DWV）、以色列蜜蜂麻痹病毒（Israeli acute paralysis virus,IAPV）和囊状幼虫病毒（Sacbroodvirus,SBV）等常见蜂群病毒在中蜂狄斯瓦螨和意蜂狄斯瓦螨中都存在,并且我们首次在中国地区的狄斯瓦螨中检测了 VDV-1和VDV-2（V arroadestructor virus2）的存在;同时,我们在各个狄斯瓦螨样品的测序数据中都发现了两组具有较高丰度的未知RNA病毒序列,其中一组序列与Varroa destructor virus 2（VDV-2）的相似度为79%,将其命名为Varroa destructor virus 2 China（VDV-2 CHHN）,另一组序列的氨基酸序列与Beihai horseshoe crab virus1的衣壳蛋白氨基酸序列相似度为32%,将其命名为Varroa destructor virus 6（VDV-6）。（2）利用RT-PCR技术调查了来自浙江和云南的狄斯瓦螨以及来自甘肃、湖北、江西、浙江、广东、云南的中蜂和意蜂成年工蜂样品中VDV-2 CHN和VDV-6的流行情况,并通过Tagged RT-PCR实验探究自然条件下上述两种病毒对蜜蜂和狄斯瓦螨的感染性。结果表明,VDV-2 CHN和VDV-6在狄斯瓦螨中广泛存在,但在蜜蜂样本中,它们只存在于在被狄斯瓦螨寄生严重的意蜂工蜂蛹中,两种病毒株的互补链都只在蜂螨样品中检出。（3）将VDV-2CHN和VDV-6人工经口接种给中蜂和意蜂成年工蜂后,通过荧光定量PCR和Tagged RT-PCR分析这两个病毒在蜜蜂体内复制和增殖情况。结果表明,在人工接种高滴度病毒的条件下,VDV-2CHN和VDV-6能在中蜂和意蜂成年工蜂体内进行复制和少量的增殖。综上所述,本研究在狄斯瓦螨中发现了两个新的RNA病毒株VDV-2CHN和VDV-6,这两个病毒株在自然条件下未表现出对蜜蜂的感染性,但在人工经口接种高滴度病毒的条件下,这两个病毒株对中蜂和意蜂成年工蜂均具有一定的感染性。本研究结果暗示狄斯瓦螨这两种新病毒株跨种传播到蜜蜂的可能。
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