用“半仿生—生物酶法”对二陈汤的试验研究

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目的:以二陈汤为例,初步探讨中药复方药效物质用“半仿生-生物酶法”研究的基本模式。方法:以橙皮苷、甘草次酸、分子量≤1000干膏量、HPLC总峰面积、总多糖含量、干浸膏等为指标,在预处理条件相同的前提下,首先通过正交设计优选半仿生-生物酶法提取二陈汤的最佳工艺,考察的因素有加酶量和种类、pH值、提取时间、温度;然后通过以上确定的最佳提取工艺和指标,将方中6味中药,按照君臣佐使分为四组,组合成15种方式进行提取,优选最佳的组合提取方式;然后根据确定的最佳提取组合方式用均匀设计的方法优选二陈汤的最佳半仿生提取工艺并用比例分割法优选二陈汤醇提取法的最佳提取醇浓度;最后以橙皮苷、甘草次酸、分子量≤1000干膏量、HPLC总峰面积、总多糖含量、干浸膏等为指标,比较半仿生-生物酶法、半仿生提取法、醇提取法和水提取法的优劣。结果:二陈汤方药用“半仿生-生物酶法”的提取条件为:将方药粉碎成粗粉,生姜和乌梅不作处理,先用2%酶Ⅰ(以药材重量计)预处理12h;陈皮、茯苓、甘草和乌梅混合提取,半夏、生姜单独提取,分别提取3次,第一次加入10倍量(以药材重量计)的pH2.0的水,0.5%酶Ⅲ,浸提60min;第二次加入8倍量的水(pH6.5),浸提30min;第三次加入8倍量的水(pH9.0),1%酶Ⅳ,浸提30min;提取温度为:371℃;SBE法的工艺条件为:三煎加水量分别为10、8、8倍,三煎用水的pH值依次为2.00、6.5、8.0;3煎时间分别为1、0.5、0.5h;醇提法最佳乙醇提纯浓度为30%。方药4种提取方法提取结果综合评分比较为:YSBEE> YSBE>YWE> YAE。结论:二陈汤提取以“半仿生-生物酶法”较佳。
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