不同胃疾病患者胃粘膜组织HpSlyD+菌株感染与Wnt通路相关蛋白表达的相关性研究

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目的:利用胃镜活检组织标本探讨不同胃疾病H.pylori阳性及HpSlyD阳性菌株感染与Wnt通路相关蛋白CDX2、E-cadherin、TCF4、β-catenin表达的关系;比较在H.pylori不同感染状态下,不同胃疾病与上述Wnt通路相关蛋白表达的相关性,明确HpSlyD阳性菌株感染的致病性及其可能的致病机制。研究方法:1.选取2008年-2011年期间庄河胃癌筛查受试者胃镜活检石蜡包埋组织标本共计365例,其中包括浅表性胃炎(GS)81例、肠化型萎缩胃炎(IM-GA)113例以及胃癌(GC)171例;男性236例,女性129例;60岁及以下患者187例,60岁以上患者178例。2.将上述石蜡包埋组织进行切片,然后提取石蜡包埋组织的DNA。3.通过PCR方法扩增H.pylori保守基因(16s rRNA、glm M等)。在H.pylori阳性人群中,利用PCR方法扩增HpslyD基因保守区。4.利用免疫组化方法检测组织标本中CDX2、E-cadherin、TCF4及β-catenin的表达情况。5.在各种疾病中,分别比较H.pylori阳性和H.pylori阴性组间及HpslyD阳性和HpslyD阴性组间上述指标蛋白表达的差异;在HpslyD阳性组中,比较CDX2、E-cadherin、TCF4及β-catenin的蛋白表达在不同疾病组间的差异;同时探讨在不同H.pylori感染状态下不同胃疾病与CDX2、E-cadherin、TCF4及β-catenin表达的相关性。通过双侧χ~2检验检测比较人胃粘膜组织标本中不同H.pylori感染组间年龄、性别的差异。利用非参数检验比较人胃粘膜组织标本中H.pylori不同感染状态与Wnt通路相关蛋白CDX2、E-cadherin、TCF4及β-catenin表达的相关性。结果:CDX2及TCF4的蛋白表达主要在细胞核,E-cadherin的表达主要在细胞膜,β-catenin的蛋白表达在细胞膜及细胞质中均存在。在浅表性胃炎组中,Hp-,Hp+相比,仅ECAD表达差别有统计学意义,Hp+高于Hp-组;HpslyD-,HpslyD+相比,仅CDX2表达差别有统计学意义,HpslyD+高于HpslyD-组;而TCF4,β-catenin膜,β-catenin质在Hp-,Hp+组及HpslyD-,HpslyD+组表达差别均无统计学意义。在萎缩性胃炎组中,Hp-,Hp+相比,CDX2,ECAD,TCF4,β-catenin膜,β-catenin质表达差别均无统计学意义;而HpslyD-,HpslyD+相比,CDX2,β-catenin膜表达差别有统计学意义;均为HpslyD+组高于HpslyD-组。ECAD,TCF4及β-cat质表达差别无统计学意义。在胃癌组中,Hp-,Hp+相比,仅CDX2表达为Hp+组高于Hp-组,其差别有统计学意义,;ECAD,TCF4,β-catenin膜,β-catenin质表达差别无统计学意义;而HpslyD-,HpslyD+相比,仅ECAD的表达差别无统计学意义,CDX2,TCF4,β-catenin膜,β-catenin质的表达差别均有统计学意义,为HpslyD+组高于HpslyD-组。在肠型胃癌组中,Hp-,Hp+相比,CDX2,ECAD,TCF4,β-catenin膜,β-catenin质表达差别无统计学意义;而HpslyD-,HpslyD+相比,CDX2,β-catenin膜,β-catenin质表达差别有统计学意义,即HpslyD+组高于HpslyD-组,而ECAD和TCF4的表达差别无统计学意义。在弥漫型胃癌组中,Hp-,Hp+相比,CDX2,ECAD,TCF4,β-catenin膜,β-catenin质表达差别均无统计学意义;而HpslyD-,HpslyD+相比,CDX2,TCF4,β-catenin膜,表达差别有统计学意义,均为HpslyD+组高于HpslyD-组;而ECAD,β-catenin质表达差别无统计学意义。在不同胃疾病组间,在HpslyD+菌株感染情况下,CDX2、TCF4及β-catenin膜表达在GS vs GA及GS vs GC组间差别有统计学意义;而ECAD和β-catenin质的表达仅在GS vs GA组间差别有统计学意义。结论:1.HpSlyD是一个胃疾病进展的毒力因子,它可以通过wnt通路的CDX2促进胃粘膜萎缩及癌变发生。2.HpSlyD可能通过wnt通路的ECAD促进肠化的发生。3.HpSlyD可能通过wnt通路的β-catenin来促进胃粘膜的肠化及癌变,尤其是肠型GC的发生。4.HpSlyD可能通过wnt通路的TCF4来促进胃癌的发生和发展,尤其是弥漫型胃癌。
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