冠心病房颤血瘀证患者血清趋化因子谱的研究

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目的:本研究以冠心病合并非瓣膜性房颤患者血清趋化因子谱为主要切入点,主要采用Luminex液相悬浮芯片实验技术检测冠心病房颤血瘀证患者血清趋化因子谱的表达水平,结合患者一般病情资料、CHA2DS2-VASc评分等客观指标,以期在生物分子层面为冠心病房颤的发生发展、诊断治疗及预后提供参考依据;同时,研究血清趋化因子谱在冠心病房颤血瘀证及非血瘀证中的差异,探讨趋化因子谱与中医血瘀证的相关性,为中医辨证用药、中药疗效观察等方面提供理论参考。方法:选取2021年4月至2021年12月于中国中医科学院广安门医院心内科住院治疗的冠心病房颤患者120例,纳入同期住院的冠心病窦性心律患者60例作为对照组及广安门医院南区体检中心正常志愿者30名作为健康对照组。收集研究对象的性别、年龄、烟酒史、既往病史、中医四诊、临床生化等一般病例资料。根据中医四诊信息辨证结果将冠心病房颤患者分为血瘀证组和非血瘀证组。抽取受试者清晨空腹状态下静脉血,提取患者血清及单核细胞样本;采用Luminex液相悬浮芯片实验技术检测血清中趋化因子谱的表达水平,利用相关软件进行KEGG富集通路探索,重点探讨冠心病房颤血瘀组中有差异表达的趋化因子,并对其中通路相关的细胞因子进一步酶联免疫吸附实验和RT-PCR技术检测验证;此外,分析冠心病房颤血瘀证CHA2DS2-VASc评分与趋化因子的相关性。结果:1.本研究共纳入冠心病患者180例,健康体检者30例:经统计学分析,冠心病组与健康对照组在年龄、性别、血红蛋白、血小板、红细胞、淋巴细胞比率、ALT等方面无统计学意义。2.将冠心病患者是否合并有非瓣膜性房颤疾病,纳入冠心病房颤患者120例,冠心病窦律患者60例。经统计学分析,冠心病房颤组与冠心病窦律组在年龄、性别、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病史、TIA/脑梗死病史等方面差异无统计学意义。3.经中医辨证,纳入冠心病房颤血瘀证患者66例,冠心病房颤非血瘀证患者34例。经统计学分析,冠心病房颤血瘀证与非血瘀证组在年龄、性别、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病史、TIA/脑梗死病史、心力衰竭病史、血红蛋白、血小板、红细胞、中性粒细胞比率等方面差异无统计学意义。4.冠心病房颤组与冠心病窦律组在RDW-SD、LYMPH%、NLR方面差异有统计学意义(P<0.05)。与冠心病窦律组相比,冠心病房颤组红细胞分布宽度-标准差(RDW-SD)为:[45.57±5.77](fL)Vs[42.00±3.13](fL);中性粒细胞-淋巴细胞比(NLR)为:[5.63±2.04](%)Vs[1.80±0.87](%)(P<0.05)。多因素 Logistic 回归结果表明:RDW-SD、NLR是冠的心病房颤独立预测因素。5.冠心病组血清趋化因子谱中:IL-8/CXCL8、IL-4、IL-10、CCL3、CCL11、CCL15、CCL17、CCL23、CCL24、CCL25、CCL27、CXCL1、CXCL10、CXCL11、CXCL16、TNF-α、CXCL5、CXCL9、CX3CL1表达水平较健康对照组升高,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。6.冠心病房颤组血清趋化因子谱中:CXCL1、CCL24、CCL23、CXCL5表达水平较冠心病窦律组显著升高,差异具有显著统计学意义。CXCL11[76.22(6.49,157.32)]pg/ml Vs[33.14(8.91,78.21)]pg/ml,差异具有显著统计学意义(P<0.01);CCL24[370.92(260.89,473.21)]pg/ml Vs[320.25(197.71,384.70)]pg/ml,CCL23[398.5(326.09,564.33)]pg/ml Vs[319.91(307.40,433.73)]pg/ml,CXCL5[840.42(587.4,897.66)]pg/ml Vs[792.22(572.71,840.42)]pg/ml差异具有显著统计学意义(P<0.05)。7.冠心病房颤血瘀证组血清趋化因子CXCL10、CXCL1平均浓度较冠心病房颤非血瘀证显著升高,CXCL10[172.12(143.00,345.92)]pg/ml Vs[110.58(90.53,142.89)]pg/ml、CXCL1[331.65(199.23,544.42)]pg/ml Vs[223.87(146.80,546.60)]pg/ml,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。8.冠心病房颤血瘀证组KEGG通路富集分析:IL-17信号通路,即IL17A/TRAF6/N F-κBp65/CXCL1、CXCL10,涉及差异表达的细胞因子有:CXCL1、CXCL10、IL-17A、NF-κBp65、TRAF6。9.冠心病房颤血瘀证组PBMC趋化因子CXCL1 mRNA、IL-17A mRNA、NF-κBp65 mRNA、TRAF6 mRNA 较非血瘀证组表达升高。CXCL1 mRNA[1.37 ± 0.53]Vs[0.79±0.17]、IL-17A mRNA[0.79±0.17]Vs[1.14±0.27]、NF-κBp65 mRNA[1.19±0.50]Vs[0.72±0.15]、TRAF6 mRNA[0.70±0.40]Vs[0.34±0.11],差异具有统计学意义(P<0.05)。10.冠心病房颤血瘀证组CHA2DS2-VASc评分高于非血瘀证组[4.00(3.00,5.00)]Vs[3.00(2.00,4.00)]。冠心病房颤血瘀证组D-Dimer(mg/L)水平高于非血瘀证组[0.38(0.28,0.56)]Vs[0.26(0.18,0.44)],两组 CHA2DS2-VASc 和 D-Dimer 评分分值具有统计学差异(P<0.05)。CHA2DS2-VASc评分及D-Dimer水平与趋化因子CXCL1、CXCL10水平无显著相关性(P>0.05)。结论:1.冠心病组血清趋化因子CXCL8、CXCL10等水平升高,与冠心病存在一定相关性。2.冠心病房颤组血清趋化因子CXCL1、CCL24、CCL23、CXCL5等水平升高,与冠心病房颤存在一定相关性。3.冠心病房颤血瘀证组的差异趋化因子富集在IL-17/TRAF6/NF-κBp65通路,且CX CL1、CXCL10、IL-17A、NF-κBp65、TRAF6 及 CXCL1 mRNA、IL-17A mRNA、NF-κBp65mRNA、TRAF6 mRNA水平升高,与冠心病房颤血瘀证存在一定相关性。
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