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体外胚胎生产(IVP)已成功地应用于动物繁育,人类不育症治疗和濒危物种保护研究,胚胎培养液及其组成成分对体外胚胎发育潜能具有重要作用。本研究的目的拟探讨甲状腺激素(THs)是否参与调控猪卵泡发生和早期胚胎的发育过程。本研究首先采用化学发光免疫分析法(CLIA)测定了不同直径大小猪卵泡THs的含量,接着运用免疫组化法对猪卵巢中THs的受体TRαα进行定位染色,应用免疫荧光技术和QRT-PCR技术分别检测体外培养猪卵母细胞和孤雌激活早期胚胎TRαα蛋白的表达定位和mRNA水平表达变化规律。最后探讨成熟培养液和胚胎培养液中分别添加不同浓度的甲状腺素(T4)和抗甲状腺激素受体α抗体(Anti-THRA antibody)对孤雌胚胎发育的影响。结果显示,猪卵泡液中甲状腺原氨酸(T3)浓度变化随着卵泡直径的增大呈现先下降后上升的趋势,T4的浓度变化随卵泡液增大而呈现上升的趋势。猪卵巢组织免疫组化染色结果显示阳性信号主要见于GCs、TCs及卵母细胞。随着卵泡的发育,TRα阳性细胞数量呈增长趋势,原始卵泡、初级卵泡,次级卵泡和成熟卵泡之间阳性细胞数量差异显著。不同成熟培养阶段猪COCs的QRT-PCR结果显示TRa mRNA在猪卵母细胞成熟过程中均有表达,呈先升后降模式,在12h形成表达峰。在孤雌激活早期胚胎1细胞胚胎期,2细胞胚胎期和4细胞胚胎期TRαα的相对表达量均显著高于8细胞胚胎期和桑葚胚胎期(P<0.05),8细胞胚胎期和桑葚胚胎期显著高于囊胚期(P<0.05)。免疫荧光观察发现,在猪体外成熟的COCs不同发育阶段颗粒细胞均表达TRαα蛋白,在24-36h卵丘颗粒细胞表达阳性最强。TRα蛋白在猪孤雌激活早期胚胎不同阶段中均有表达,且8细胞、桑葚胚和囊胚的阳性信号较强。胚胎培养液中添加10ng/mL的T4显著提高猪孤雌胚胎的囊胚率(P<0.05),添加Anti-THRA antibody显著抑制后期孤雌胚胎的发育潜能,囊胚率显著降低(P<0.05)。结论：不同直径猪卵泡液中均存在THs,不同成熟阶段COCs和早期胚胎均表达TRα,猪胚胎培养液中添加适当浓度T4显著提高猪孤雌胚胎的发育潜能,推测THs可能通过与TRa结合而参与调控猪卵泡发生和早期胚胎发育。